重组DNA技术与重组蛋白表达6.pptVIP

重组DNA技术与基因工程的基本概念 A 酵母作为表达外源基因受体的特征 A 酵母作为表达外源基因受体的特征 B 酵母的宿主系统 C 酵母的载体系统 D 酵母的转化系统 E 酵母的表达系统 F 利用重组酵母生产乙肝疫苗 G 酵母糖蛋白生产的人源化改造 H 酵母转录机器的基因工程综合改造 E 酵母的表达系统 酵母表达系统的选择 巴斯德毕赤酵母是一种甲基营养菌，能在低廉的含甲醇培养基中生 巴斯德毕赤酵母表达系统 长，甲醇可高效诱导甲醇代谢途径中各酶编码基因的表达，因此生长迅 速、乙醇氧化酶基因AOX1所属强启动子、表达的可诱导性是巴斯德毕 赤酵母表达系统的三大优势。但甲醇易挥发，操作条件差。 由于巴斯德毕赤酵母没有合适的自主复制型载体，所以外源基因的 表达序列一般整合入受体的染色体DNA上。在此情况下，外源基因的 有经济价值的重组蛋白在巴斯德毕赤酵母系统中获得成功表达。 高效表达在很大程度上取决于整合拷贝数的多寡。目前已有50余种具 酵母表达系统的选择 多型汉逊酵母也是一种甲基营养菌。其自主复制序列HARS已被克 多型汉逊酵母表达系统 隆，并用于构建克隆表达载体，但与巴斯德毕赤酵母相似，这种载体在 受体细胞有丝分裂时显示出不稳定性。所不同的是，HARS质粒能高频 自发地整合在受体的染色体DNA上，甚至可以