02核酸的结构和功能.docVIP

第二章 核酸的结构和功能 核酸的化学组成及一级结构 核酸 1.概念：以核苷酸为基本组成单位的生物信息大分子，具有储存、携带和传递遗传信息的功能。 2.核酸的分类及分布： 脱氧核糖核酸DNA：存在于细胞核，线粒体，叶绿体，携带遗传信息 核糖核酸RNA：分布于细胞核、细胞质、线粒体，参与遗传信息的复制与表达。 元素组成：C、H、O、N、P（9-11%） 核酸的基本单位——核苷酸 碱基：嘌呤碱，嘧啶碱 戊糖：核糖，脱氧核糖 磷酸 碱基 A—T,A—U,G—C以氢键结合；A—T,A—U配对形成两个氢键，G—C配对形成三个氢键。 戊糖 核苷 核苷酸 核酸 多个核苷酸由前一位的3’—OH与下一位的5’—磷酸基之间形成的3’，5’-磷酸二酯键连接、形成的链状聚合物，即多聚核苷酸。 核酸的一级结构： 1、定义：核酸中核苷酸的排列顺序/碱基序列。 2、连接：3，5 磷酸二酯键 3、方向：5→3 二．DNA的空间结构与功能（细胞内含量最稳定的成分） (一)DNA的二级结构——双螺旋结构 1.DNA双螺旋结构的研究背景 Chargaff 规则： 所有DNA分子，A=T, C=G, A/T=G/C=1，A+G=T+C 不同生物种属的DNA碱基不同： 同一个体不同器官或不同组织的DNA具有相同的碱基组成； 对于一特定组织的DNA，其碱基组分不随其年龄，营养状态和环境变化 DNA螺旋双模型结构要点(dAMP, dGMP, dCMP,dTMP) DNA双螺旋结构的多样性 DNA双螺旋结构的多样性 DNA中只有模板链可为一条蛋白质编码。 DNA的高级结构——超螺旋结构 DNA双螺旋链再盘绕即形成超螺旋结构。正负超螺旋：盘绕方向与DNA相同的为正超螺旋。自然界的闭合双链DNA主要以负超螺旋形式存在。 原核生物DNA的环状超螺旋结构 真核生物DNA以核小体为单位形成高度有序致密结构 三．RNA的结构与功能(AMP, GMP, CMP, UMP) （一）蛋白质合成的模板——mRNA 1.在生物体内，mRNA的丰度最小，占细胞RNA总量的2%~5% 2.真核生物mRNA结构 结构特点： 5′帽子结构：反式的7-甲基鸟嘌呤-三磷酸糖苷（m7Gppp）; 3′末端多聚A尾polyA； 真核生物hnRNA的编码区(外显子)和非编码区（内含子） mRNA经前体hnRNA的剪接而成熟。内含子被剪切掉，使得外显子连接在一起。 mRNA二级结构为单链局部可形成双链 功能功能 1.tRNA占细胞总RNA的15% 2.tRNA的结构（磷酸，甲基化核糖，碱基） （1）tRNA含有多种稀有碱基 tRNA中的稀有碱基占所有碱基的10%~20%，均是转录后修饰加工而成的。如尿嘧啶核苷酸，次黄嘌呤核苷酸，二氢尿嘧啶核苷酸等。 （2）tRNA的二级结构—三叶草形 tRNA具有四个茎和三个环，从5’~3’，三个环依次为：DHU环，反密码子环（功能：读码），TΨC环。四臂为：氨基酸臂（功能：携带氨基酸），DHU臂，反密码子臂，TΨC臂。其中反密码子环中的反密码子能识别mRNA中相应的密码子。tRNA的3’—末端均为CCA序列，是携带氨基酸的部位。 tRNA的三级结构— 倒L形 tRNA是分子量最小的RNA功能 核糖体RNA（rRNA）是细胞内含量最多的RNA，约占RNA总量的80%以上。rRNA与核糖体蛋白构成核糖体，是蛋白质合成的装配机。核糖体由大小两个亚基组成。 核酸的理化性质 核酸含有磷酸基团和碱基，属于酸碱两性物质，可发生两性电离，每种核酸有自己的等电点，可电泳分离。 由于溶液中的核酸分子在引力场中，可用超速离心法纯化核酸。 DNA是线性分子，溶液的黏度大，而RNA远小于DNA，溶液的黏度小。 260nm紫外吸收性质——核酸的嘌呤，嘧啶含有共轭双键 DNA变性：双链解为单链 在某些理化因素（高温，强酸，强碱，加尿素，有机溶剂）作用下，会导致DNA双链互补碱基对之间氢键发生断裂，双螺旋结构的DNA解离为单链。DNA变性只改变其二级结构，不改变其一级结构。 破坏双螺旋稳定的力：静电斥力 2.变形后的DNA刚性减弱，黏度降低，浮力密度增加，沉降速度增加，产生增色效应（在260nm波长处的紫外线吸收增强）DNA变性并不产生吸收波长发生转移。 3.链解温度 DNA变性特点：骤然、突发式 链解温度Tm：热变性是在一个相当窄的温度范围内完成，在这一范围内，紫外光吸收值达到最大值的50%时的温度称为DNA的解链温度，又称熔解温度Tm。 Tm=4（G+C）+2（A+T）寡核苷酸片段 核酸愈纯，Tm范围愈小；核酸分子愈小，Tm范围愈小 在此温度时，50%的DNA双链被打开。 Tm与G+C含量成正比 DNA的复性与分子杂交 热变性的DNA经缓慢冷却后即可重