DNARAN琼脂糖凝胶电泳.pptVIP

核酸的提取及琼脂糖凝胶电泳 目录  核酸的理化性质 理化性质 DNA化学性质稳定，物理上易碎，粘度大 RNA化学性质比DNA活泼，易受RNA酶的污染 溶解性 均溶于水 不溶于一般有机溶剂,在70%乙醇中形成沉淀 核酸分离、纯化原则 1、保持核酸分子一级结构的完整性 温度不要太高 控制pH值范围(pH值5-9) 保持一定离子强度 减少物理因素对核酸的机械剪切力 核酸分离、纯化原则 核酸酶能消化核酸链中的磷酸二酯键，破坏核酸一级结构。 所用器械和一些试剂需高温灭菌 提取缓冲液中需加核酸酶抑制剂 DNA酶抑制剂 金属离子螯合剂： DNA酶需要金属二价离子Mg2+、Ca2+的激活，常用EDTA(乙二胺四乙酸)离子螯合剂，可抑制DNA酶活性。 阴离于型表面活性剂 SDS除对核酸酶有抑制作用外，还能使蛋白质变性，并与变性蛋白结合成带负电荷的复合物，该复合物有核酸