TPO基因分离获得及工程菌的构建.pptVIP

TPO基因的特点 没有哺乳动物常见的启动子元件 第一个转录起始位点上游存在ETS的特异结合位点 单独的ets元件并不能形成更有效的DNA蛋白质复合体 在TPO基因的上游5’非翻译区存在7个非生理性起始密码子(uAUG) cDNA长1774bp，并带有Poly（A）尾，cDNA中含有1059bp的开放阅读框，编码353个氨基酸，ORF 5’段侧翼有215bp，3’段侧翼有500bp为非翻译序列，ORF编码的序列N端有21个氨基酸具有高度疏水性，为信号肽，所以人的TPO分子有332个氨基酸组成 RT-PCR 引物选择 鉴于 TPO对血小板缺乏症的良好疗效，近年来国内外研究者已多次尝试在大肠杆菌、 COS-7细胞、酵母、昆虫细胞等体系中表达重组的TPO，下面我们将一一为大家介绍 TPO全长分子大肠杆菌内的表达 TPO动物细胞中的表达 TPO、EPO融合蛋白在动物细胞中的表达 TPO病毒在酵母细胞中的表达 构建TPO病毒，感染昆虫细胞 TPO在大肠杆菌内的表达 TPO检测 IPTG诱导 裂解细胞得到包涵体 SDS蛋白电泳 纯化蛋白