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Western blot 实验技术 一、定义： 印迹法（blot）是指将样品转移到固相载体上，而后利用相应的探测反应来检测样品的一种方法。 1975年，Southern建立了将DNA从琼脂糖凝胶转移到硝酸纤维素膜（NC膜）上，并利用DNA－RNA杂交检测特定的DNA片段的方法，称为Southern印迹法（ Southern blot)。 而后人们用类似的方法，对RNA和蛋白质进行印迹分析，对RNA的印迹分析称为Northern blot ，对单向电泳后的蛋白质分子的印迹分析称为Western blot 。 一、定义： 要检测一个基因的表达产物是否正确，或者比较表达产物量的相对变化，首选方法是Western Blot。 Western blot 是生物学、生物化学、分子生物学和免疫遗传学中常用的一种实验方法。 Western blot整个过程主要包括：PAGE电泳、转膜及蛋白检测3个阶段。 　 凝胶浓度与蛋白分离范围 二、聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）的原理 二、聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）的原理 三、Western Blot 基本原理 经过PAGE分离的蛋白质样品，转移到固相载体（例如硝酸纤维素薄膜）上，固相载体以非共价键形式吸附蛋白质，且能保持电泳分离的多肽类型及其生物学活性不变。 以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原，与对