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第九章liu-9-转基因动物与生物反应器
三、转基因动物的应用 改良动物品种 通过转移和表达适当的基因,使目的基因在宿主 基因组中得以表达,就可以培育出动物新品种。 如,提高动物生长速度、改良肉质和乳质、增强动物 抵抗力。 2. 生物制药 转基因动物最大的应用就是用作乳腺生物反应 器。利用转基因动物来生产贵重的医用药物是目前 世界范围内转基因研究的热点之一。 3.建立诊断和治疗人类疾病的动物模型 转基因动物是对多种生命现象本质深入了解的工具,如研究基因的结构与功能的关系,细胞发育的潜能性,细胞核与细胞质的相互关系,胚胎发育调控,肿瘤,神经与发育等。 还可以用来建立多种疾病的动物模型,进而研究这些疾病的发病机理及治疗方法。 4. 生产可用于人体器官移植的动物器官 利用转基因技术,通过免疫排斥相关基因转基因动物的建立。能够解决人类器官移植供体来源不足问题,促进异源器官移植研究和工作的进展。例如,培育出人体免疫系统基因的转基因猪心脏。 * * 第九章 转基因动物与动物生物反应器 一、转基因动物的定义及简单发展史 二、转基因动物的培育技术 三、转基因动物的应用 四、转基因动物应用面临的问题 五、动物乳腺生物反应器 纲要 转基因动物(transgenic animal)是指借助基因工程技术将外源基因导入受体动物染色体内,外源基因与动物基因整合后随细胞的分裂而扩增,在体内表达并能稳定地遗传给后代的动物。 一、转基因动物的定义及简单发展史 1974年,Jaenish和Mintz将纯化的SV40 DNA注入老鼠的囊胚腔(blastocoele cavity)中,在该胚胎发育成鼠之后,可以在老鼠体组织中侦测到注入的DNA。由此可以推断:注入的DNA可以插入胚胎细胞的染色体组(genome)内。 1980,Gorden et al.发表了第一篇有关成功地经由微量注射(microinjection)将基因转殖到老鼠体细胞中的研究报告。随即,也有不少研究单位利用相同的方法植入许多转殖基因。 1982年,Palmiter获得转基因小鼠。转入大鼠的生长激素基因,使小鼠体重为正常个体的二倍,因而被称为“超级小鼠”。 以后相继在10年间报道过转基因兔、绵羊、猪、鱼、昆虫、牛、鸡、山羊、大鼠等转基因动物的成功。 由于转基因动物体系打破了自然繁殖中的种间隔离,使基因能在种系关系很远的机体间流动,它将对整个生命科学产生全局性影响。因此转基因动物技术在1991年第一次国际基因定位会议上被公认是遗传学中继连锁分析、体细胞遗传和基因克隆之后的第四代技术,被列为生物学发展史上126年中第14个转折点。 评价: 二、转基因动物的培育技术 转基因动物培育的基本过程 是借助分子生物学和胚胎工程的技术,将外源目的基因在体外扩增或加工,再导入动物的早期胚胎细胞中,使其整合到染色体上,当胚胎被移植到代孕动物的输卵管或子宫中后,发育成携带有外源基因的转基因动物。 生物体细胞中的DNA能精确合成并防止被DNA酶降解是由于存在由限制酶与修饰酶组成的生物屏障。 一般情况下,限制酶能将外源DNA切割并降解掉,而细胞本身合成的DNA由于修饰酶的甲基化作用而避免了被限制酶降解从而保持遗传稳定性。 但是,偶然也会发生外源DNA幸免降解的情况,使生物体产生小的变异。转基因技术就是利用生物这一特性,把外源基因注入细胞核而获得符合要求的转基因动物。 转基因动物培育的理论基础 培育转基因动物的关键技术 外源目的基因的制备 外源目的基因的有效导入 胚胎培养与移植 外源目的基因表达的检测 (1)基因显微注射法 (2)逆转录病毒感染法 (3)胚胎干细胞介导法 (4)精子载体导入法 (5)YAC介导的基因转移 (6)细胞核移植技术 外源目的基因的导入方法 显微注射法原理 通过显微注射仪将外源基因直接注射到受精卵的雄原核内,使外源基因整合到DNA中,发育成转基因动物。 基因显微注射法制备转基因动物的操作步骤: 1)目的
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