桑花叶型萎缩病类病毒疾病传播途径的研究.pdfVIP

29刍g 江莩套业20164期——————————————————————————————匿 ，(1—丫T、 卜试验·l 卜 ·{ 桑花叶型萎缩病类病毒疾病传播途径的研究 卜研究·l 、(j—j—j。，， 1 吴 陈梦姣1 白锡)Jl 岩2 费建明3 张德明4 3．浙江省湖州市农业科学院，浙江湖州313000；4．吴兴区妙西镇农业服务中心) mosaicdwarf 摘要以桑花叶型萎缩病(Mulberry PCR分子检测技术的应用，在被桑花叶型萎缩病病原污染的土壤上栽培的桑树的花、叶、病健桑树花粉杂交的果实以及果实 培育的苗中都检测到小分子RNA，表明了桑花叶型萎缩病的小分子RNA可通过土壤、花粉、果实传染，这对类病毒侵染循环 规律研究和防止病原扩散提供了一个新思路。 关键词桑树花叶型萎缩瘸传染 中图分类号：$888．71+2文献标识码：A 文章编号：2016-10-28-001 人类对类病毒研究历史虽然还较短，但在基础 1材料与方法 性研究已经取得了不小进步，类病毒的结构、不同区 间的功能、在体内的复制和运动等¨‘61已逐渐清晰； 1．1花粉、果实、苗中的类病毒检测与试验设置 因类病毒是不显性感染，症状表现时间较长，所以在 1．1．1材料与主要试剂 传播方式等方面的研究相对比较薄弱；早期报道，类 供试植物为桑树，病源为桑花叶型萎缩病类病 病毒的传播主要通过生产工具和嫁接；近年来其它 毒[141；带毒的花粉采自疫区病株上自然花粉，病株 方式的传播报道渐渐增多，1999年wall等发现葡萄外观证状明显，在枝、花粉、果实中都检测到桑花叶 萎缩病类病毒小分子RNA。健康桑树为离疫区20 黄斑类病毒可以通过种子传播【7|；Singh等(1992) 通过分子检测技术，证实了马铃薯纺锤类病毒能通 公里的浙江省湖州市农业科学研究院围墙内的桑 过花粉和种子传播旧o；花粉能否传播类病毒疾病， 树，桑品种为农桑12号，栽种已有10年历史，一直 有关方面有不同看法，J．Matousek通过对啤酒花矮没有发现过桑花叶型萎缩病；试验前对试验个体的 化类病毒(Hostuviroid)的花粉不同时期进行检测，枝、花、果进行检测，都没有检测到类病毒小分 花粉前期检测到小分子RNA，而成熟期检测不到， 子RNA。 推测花粉中的小分子RNA在花粉后期的有丝分裂 RNA提取试剂盒购白天根生化科技(北京)有 中被降解，由此认为啤酒花潜隐类病毒不能通过花 限公司。DNaseI(RNase 粉传播一’；在早期的研究中，研究者认为桃潜隐花 Transeriptase购自TaKaRa公司。 叶类病毒可以通过嫁接或芽接传播，但不能种传和 1．1．2试验设置 试验在2010年、2011年春夏季进行，早春桑树 花粉传播(Desvignes，1986；Flores等，1992；Howell 等，1998)，但Barba等(2007)在18个桃树品种的花初花期，雌花柱头尚未展开时，选择10株健康桑树， 粉中有13个检测到了桃潜隐花叶类病毒，因此他们 用镊子将雄花全部除去，然后用20x50纸袋套在雌 认为桃潜隐花叶类病毒可以通过花粉传播，而不能 花穗上，纸袋口用细绳结扎紧，并在雌花柱头快张开 通过根和种子传播¨肛13J。为了确认类病毒传播途 前再检查补做一次去雄工作，以期杂交彻底。 径，有效控制类病毒疾病扩散危害，以桑树花叶型萎 疫区病株上采集花粉：将雄花开放、花粉将散未 缩病类病毒为材料，通过病健桑树花粉杂交、不同土 散的花穗从病树上采下，集中于瓷盘内，然后放人烘 壤处理、大量大田调查和RT—PCR分子检测技术应箱中，保持30℃±O．5cC中存放24h，取出后，抖动花