分子生物学课件第九章蛋白质的生物合成——翻译.pptVIP

② 原核生物肽链合成的起始 ☆ 70S 起始复合物的形成 50S亚基结合30S-IF3-mRNA-IF2 - fmet-tRNAfmet-GTP，导致IF3的解离，同时激活IF2的GTPase的活性，水解GTP，改变IF1、IF2的构象并使其解离，形成70S起始复合物。 大肠杆菌蛋白质合成所需的起始因子 起始因子 相对分子质 量（×103） 功 能 IF﹣1 IF﹣2 IF﹣3 9 97 22 促进IF-2和IF-3的活化 促进fmet-tRNAfmet与30S小亚基结合，并具有GTPase活性 使30亚基从70S核糖体释放，帮助mRAN结合于30S亚基上 第九章 蛋白质的生物合成——翻译 70S起始复合物形成示意图 第九章 蛋白质的生物合成——翻译 ⑴ 肽链合成的起始 ③ 真核生物肽链合成的起始 起始密码子AUG的识别 第九章 蛋白质的生物合成——翻译 ③ 真核生物肽链合成的起始 起始复合物的形成 第九章 蛋白质的生物合成——翻译 3.2 肽链的合成过程 ⑵ 肽链的延伸（原核） 肽链的延伸以氨基酰﹣tRNA进入70S起始复合物的A位为标志。在肽链延伸过程中，每添加1个氨基酸需要包括进位、转肽和移位三步。这三步反复循环就完成了肽链的延长。这一过程需要三个延伸因子EF﹣Tu、EF﹣Ts和EF﹣G的参与。 ① 进位 指新的氨基酰﹣tRNA进入70S复合体A位的过程需要消耗GTP，并需EF-Tu（热不稳定），EF-Ts（热稳定）两种延伸因子。 第九章 蛋白质的生物合成——翻译 进位 第九章 蛋白质的生物合成——翻译 Tu-Ts循环 在肽酰转移酶的作用下P位点上fMet-tRNAfMet的甲酰甲硫氨酸从相应的tRNA上解离下来，其-COOH（高能酯键）与刚进入A位的氨酰-tRNA上的-NH2形成肽键（实质是A位点氨基酰-tRNA氨基亲核攻击酯键羰基），无负荷的tRNA留在P位，此时A位点携带一个二肽。 ② 转肽 （肽键的生成） ⑵ 肽链的延伸（原核） P A AA-fMet AA A P fMet 第九章 蛋白质的生物合成——翻译 转肽 第九章 蛋白质的生物合成——翻译 在EF-G（移位酶）的作用下，核糖体沿mRNA5’? 3’方向移动，每次移动一个密码子的距离，结果使原来在A上的肽酰-tRNA移到了P位点，原来在P位点的无负载的tRNA离开核糖体，同时一个新的密码子进入空的A位， EF-G 催化的移位过程需水解GTP提供能量。肽链合成从N-C。 ③ 移位 ⑵ 肽链的延伸（原核） P A 5’ 3’ P A 5’ 3’ P A P A AA 第九章 蛋白质的生物合成——翻译 原核生物肽链延伸的三位点模型 第九章 蛋白质的生物合成——翻译 移位 第九章 蛋白质的生物合成——翻译 EF﹣Tu EF﹣Ts EF﹣G 43 74 77 结合氨酰﹣tRNA和GTP 使EF﹣Tu、GTP再生，参与肽链延伸 结合GTP，启动肽酰﹣tRNA从A位移向P位 延伸因子 相对分子质 量（×103 功 能 大肠杆菌蛋白质合成所需的起始因子 第九章 蛋白质的生物合成——翻译 ⑶ 肽链合成的终止 3.2 肽链的合成过程 当终止密码子出现在A位时，终止因子结合在A位，肽链合成终止。 RF1：识别终止密码子UAA和UAG RF2：识别终止密码子UAA和UGA RF3：具GTP酶活性，激活RF1和RF2活性，协助肽链的释放 终止因子的结合使肽酰转移酶活性变为水解酶活性，肽基不转移给A位tRNA，而转移给H2O，并把已合成的多肽链从核糖体和 tRNA上释放出来，无负荷的tRNA随机从核糖体脱落，该核糖体立即离开 mRNA，在IF3存在下,消耗GTP而解离为30S 和50S非功能性亚基。再重复下一轮过程。 第九章 蛋白质的生物合成——翻译 肽链合成的终止 第九章 蛋白质的生物合成——翻译 3.3 蛋白质合成中 GTP 的作用 ⑴ 使各种翻译因子与 tRNA 或核糖体易于以非共价键结合； 水解成 GDP 和 Pi 的反应是释放结合因子的信号 原核：IF2、 EF-Tu、EF-G 真核：eIF-2、eEf-1、eEf-2 ☆ GTP 是一种变构因子 ⑵ GTP水解释放的能量提高核糖体结合氨酰-tRNA 和移 位的能力 ⑶ GTP还有使翻译准确的功能 ☆ 为去除A位不正确的氨酰-tRNA提供能量 第九章 蛋白质的生物