分子生物学第五章原核基因表达调控2011五年制终稿.pptVIP

* * * * * * * * * * * * * * * * * * * 2. RNA稳定性与调控的关系 细菌mRNA通常不稳定。 细菌的生理状态和环境影响mRNA降解。 mRNA稳定性与其序列和结构有关。 3.蛋白质合成的自身调控 如：核糖体蛋白 小 结 概述（掌握相关名词解释） 原核生物基因表达的特点（熟悉） 原核生物基因表达的调控机制 ?转录起始的调控（掌握） 转录终止的调控（了解） 翻译水平的调控（了解） 复 习 题 一、名词解释： 基因表达 多顺反子 单顺反子 二、简答题： 1.乳糖操纵子的结构有哪些？ 2.乳糖操纵子在有乳糖没有葡萄糖时如何进行调控？ 四、单项选择题： 大多数原核基因转录单位为： A.多顺反子 B.单顺反子 C.操纵基因 D.反式作用因子 三、判断题：所有基因的表达产物都是蛋白质。（ ） 1 学科网址介绍：中南大学生物科学与技术学院分子生物学研究中心 /mbrc/ 个人联络方式：刘 静 邮箱：jingliucsu@ 办公电话Thank you! * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * 核心酶 (core enzyme) 全酶 (holoenzyme) ?? ? ? ? ? ?? ? ? ? 例如:大肠杆菌RNA 聚合酶由5个亚基（α2ββˊб）构成，核心酶（α2ββˊ）能以DNA为模板合成RNA，但必须依靠б因子协助才能在正确位置起始转录。 不同的σ因子决定RNA聚合酶对一个或一套启动子序列的特异性识别和结合能力。 最早发现的σ因子：σ70 新发现： σ32、 σ54 、σ28 机理：б因子含有识别启动区的结构域。 a.б因子独立存在时，N端抑制了C端DNA结 合活性，与DNA不能结合。 b.当б因子与核心酶组成全酶后，N端对C端 抑制作用消失，可与DNA特异结合。 c.转录起始完成后б因子脱落，核心酶向下 游滑动完成转录。 （2）启动区序列 启动区序列是RNA聚合酶结合并启动转录的特异DNA序列。(保守序列) RNA转录起始 -35区 -10区 TTGACA TTAACT TTTACA TATGAT TTTACA TATGTT TTGATA TATAAT CTGACG TACTGT N17 N16 N17 N16 N16 N7 N7 N6 N7 N6 A A A A A trp tRNATyr lac recA Ara BAD TTGACA TATAAT 共有序列 90%以上为 嘌呤核苷酸 共有序列决定启动序列的转录活性强弱。 某些特异因子（蛋白质）决定RNA聚合酶对一个或一套启动序列的特异性识别和结合能力。 2.转录起始的负调控 乳糖操纵子（lactose operon,lac）是原核生物基因转录负调控的最典型模式。 乳糖操纵子(lac operon)的结构 结构基因 Y： 透酶 Z： β-半乳糖苷酶 A：乙酰基转移酶 阻遏基因I 调控区 CAP结合位点 启动子 操纵元件 Z Y A O P DNA mRNA 阻遏蛋白 I DNA Z Y A O P 有葡萄糖存在，没有乳糖存在 阻遏蛋白的负性调节 阻遏基因 mRNA 阻遏蛋白 I DNA Z Y A O P pol 有葡萄糖存在，没有乳糖存在 阻遏蛋白的负性调节 阻遏基因 mRNA 阻遏蛋白 没有葡萄糖存在 有乳糖存在时 I DNA Z Y A O P pol 启动转录 乳糖 半乳糖 β-半乳糖苷酶 mRNA 阻遏蛋白 没有葡萄糖存在 有乳糖存在时 I DNA Z Y A O P pol 启动转录 mRNA 乳糖 β-半乳糖苷酶 半乳糖 仅有葡萄糖 葡萄糖耗完 有乳糖存在 阻遏蛋白与操纵基因结合分子机制： 操纵基因区域具有反向重复序列（能与蛋白质特异结合的DNA特征性结构）。? ? -10 +1 +10 +20 +30 5′ATGTTGTGTGGAATTGTGAGCGGATAACAATTTCACACAGGAA 3′ 3′ TACAACACACCTTAACACTCGCCTATTGTTAAAGTGTGTCCTT 5′ ? RNA聚合酶与阻遏蛋白互斥分子机制： 操纵基因在操纵子的位置是从-7至+28，RNA聚合酶所占区域是