第一章蛋白质的结构与功能-统编4节.pptVIP

低温有机溶剂沉淀法： 极性强的有机溶 剂（如丙酮、乙 醇）能破坏蛋白 质的水化膜，使 之沉淀。（低温 下不变性） pH = pI 三、电 泳 法 电泳：不同蛋白质的pI不同，故在同一 pH 值的溶液中不同蛋白质所带电荷量也不同，致使在电场中的泳动速度不同，从而分离蛋白质。 影响泳动速率的因素：带电量 分子量 分子形状 四、层析 离子交换层析 凝胶过滤（分子筛层析） 亲和层析 * 一、蛋白质的一级结构 ( primary structure) 概念：指多肽链中从N端到C端的氨基酸排列顺序。 维持一级结构的化学键是肽键。 二、蛋白质的二级结构 (secondary structure) 概念：指多肽链上某段主链骨架原子的空间位置，不涉及侧链构象。 由主链氢键维系其构象。 基本形式：1）?-螺旋（常见） 2）?-折叠（常见） 3）?-转角 4）不规则卷曲 主链骨架原子：N、C?、Co Cα Cα C0 N 肽键的特性 肽键长 0.132 nm C-N单键 0.149 nm C=N双键 0.127 nm 肽键具有部分双键性质 (不能自由旋转) 肽单元(肽平面)：指参与肽键形成的 6 个原子（C?1、C、O、N、H、C?2）处于同一个平面上。 Cα Cα C 肽单元平面的旋转：两个相邻的肽平面围绕 C?的单键(C?-N与C?-C键)旋转，形成各种形式的主链构象。 Cα 1）? - 螺旋的特点 (? - helix) 主链围绕中心轴呈右手螺旋上升，上升一圈含3.6个氨基酸残基； 主链氢键（每个肽键的N-H 与第四个肽键的C=O形成的氢键）维持螺旋稳定; 侧链位于外侧。 2）?- 折叠的特点 （?-pleated sheet） 两条以上多肽链或一条多肽链的若干肽段互相靠拢，平行排列，折叠成锯齿状的片层结构； 多肽链充分伸展； 通过主链间氢键并联成片； 侧链交替伸向片层的上方和下方（侧链较小） 蚕丝蛋白 三、蛋白质的三级结构 （tertiary structure） 概念：指整条多肽链中所有原子的空 间位置。(包括主链构象和侧链构象) 主要由次级键维系其构象。 多肽链在二级结构基础上进一步盘曲，疏水侧链常位于分子内部，亲水侧链常位于分子表面。 有生物学功能的蛋白质(特别是球状蛋白)一般至少应具备三级结构。 肌红蛋白的三级结构 维持三级结构稳定的键 1. 次级键（起主要作用）—— 非共价键 1）疏水键（疏水作用） 2）盐键（离子键） 3）氢键（主链氢键和侧链氢键） 4）范德瓦氏力 （Van der Waals——分子引力） 2. 二硫键 —— 共价键 四、蛋白质的四级结构 （quaternary structure） 概念：由两条或两条以上多肽链各自形成具有三级结构的亚基，并通过次级键相互连接的空间排布。 亚基(subunit)：在四级结构的蛋白质中，每一条具有完整三级结构的多肽链，称之。 亚基间主要靠氢键和离子键连接 血红蛋白（含4个亚基） 五、蛋白质的分类 单纯蛋白质：完全由氨基酸组成 结合蛋白质： 蛋白质部分 + 非蛋白质部分 （辅基） (辅基：寡糖、脂类、色素、金属离子等) 纤维状蛋白：长轴／短轴10 球状蛋白： 长轴／短轴10 成 分 形 状 一级结构是空间结构的基础 空间结构决定生物学功能 第三节 蛋白质结构与功能的关系 牛核糖核酸酶的变性与复 性 天然RNase 空间结构完整 RNase变性 生物学活性丧失 RNase复性 生物学活性恢复 第四节 蛋白质的理化性质 一、蛋白质两性电离和等电点 蛋白质具有两性电离特性 ? 多肽链两端氨基、羧基可电离 ? 酸性和碱性氨基酸残基侧链上的羧 基、氨基、胍基、咪唑基均可电离 蛋白质的等电点 ( pI )：当溶液处于某 一 pH 值时，蛋白质电离成正、负电 荷的数量相等，净电荷为零，此时溶 液的 pH 值称为该蛋白质的等电点。 ? NH3+ NH3+ NH2 COOH