分子生物学第6章真核生物的转录.pptVIP

教学要求 理解真核生物基因转录的特点 掌握聚合酶I、聚合酶Ⅱ和酶III作用基因转录的起始 了解真核生物基因转录所参与的转录因子 第1节 三种RNA聚合的特性和功能 一、真核生物RNA聚合酶 二、真核生物RNA聚合酶的活性 第2节 RNA聚合酶I基因：核糖体重复 一、rRNA 基因的结构 二、RNA聚合酶I启动子和结合因子 三、 其他rRNA基因 一、rRNA 基因的结构 1. 核糖体 RNA 基因 一个拷贝的18S，5.8S和28SrRNA基因组成一个的转录单元 前RNA转录单元在基因组中成簇排列，中间被非转录的间隔序列分开。 一、rRNA 基因的结构 2. 核仁的作用 rRNA基因簇排列成环一起组成核仁，即核仁组织区域。 前rRNA转录物与rRNA基因一起包装成电镜下可见的“圣诞树结构” rRNA的生产和修饰区域。 二、RNA聚合酶I启动子和结合因子 1. RNA Pol I promoters 启动子 即Ⅰ型启动子，由2部分保守序列组成： –核心启动子（core promoter）或核心元件（core element），位于-45到+20，负责转录的起始。 –上游控制元件（upstream control element , UCE），从-180延伸到-107，可增加核心元件的转录起始的效率。 二、RNA聚合酶I启动子和结合因子 2. Upstream binding factor (UBF) 上游结合因子 能结合到UCE以及核心元件上游的不同位点，使两个位点之间的DNA环化。 essential for high level of transcription 二、RNA聚合酶I启动子和结合因子 3. 核心结合因子 Selectivity factor 1 (SL1) 选择因子1 含有4个亚基 TBP(TATA-binding protein):. 一个通用转录因子，使RNA聚合酶结合到起始位点起始转录所必需的。 TAF1s: RNA Pol I转录特有的TBP-相关因子 RNA聚合酶I的转录起始复合物装配 两个UBF分别特异性地结合到上游控制元件(UCE）和核心启动子上，通过UBF蛋白质的相互作用，使UCE与核心启动子之间的DNA形成环状结构 SL-1结合到UBF-DNA复合物上 RNA聚合酶I就结合到核心启动子上，形成开放性起始复合物。 第3节 RNA聚合酶III基因：5s 和tRNA转录 一、 RNA polymerase III 二、 tRNA genes 三、 5S rRNA genes 一、 RNA polymerase III 至少含有16个亚基 位于核质 合成前体5S rRNA、tRNA和其他小分子核及胞质RNAs 一、 RNA polymerase III RNA polymerase III 启动子 分为二类，每种识别方式不同 内部启动子：由起始位点下游的两个序列组成，A框和B框(C框) 上游启动子： 由起始位点上游的序列组成(DSE, PSE, TATA).。 二、 tRNA genes 1. transcription control regions 转录调控区域 位于转录单元内的转录起始位点之后 含量有两个高度保守的调控序列： A box and B box A box: 5’-TGGCNNAGTGG B box: 5’-GGTTCGANNCC 编码tRNA分子中的D-环和T?-环 二、 tRNA genes 2. 两个复杂的DNA-结合因子 TFШC：能与A框和B框结合，是定位TFШB的包装因子 TFШB:能结合A框50bp的上游序列；由TBP、BRF和B ?三个亚基组成。可使RNA聚合酶III结合进来并起始转录。 3. tRNA基因转录起始复合物的装配 TFIIIC结合到A框和B框上 TFIIIB结合于A框上游约50bp的位置，并只与TFIIIC相互作用，而与DNA序列无关 RNA聚合酶结合于TFIIIB-TFIIIC-DNA复合物，随后，TFIIIC从该复合物释放出来。 三、 5S rRNA genes 1. 唯一单独被转录的rRNA亚基，并也是串联排列在基因簇中。 2.Transcription control regions (promoter) A box:+50 to +65 C box: +81 to +99 三、 5S rRNA genes 3. 转录因子 TFIIIA:C框的特异性DNA结合蛋白，作为装配因子使TFIIIC与5S rRNA 启动子结合 TFIIIC: 能与C框、A框及起始位点附近的DNA结合 TFIIIB：能与以上结合的复合物相互作用，并促使Pol III结合而起始转录。 5SrR