转录和加工II.pptVIP

真核生物RNA合成与加工 真核生物三种RNA聚合酶的比较 RNA聚合酶II启动子 TATA box启动子上预起始复合物装配 5S rRNA基因内启动子的定位实验分析 5S rRNA基因启动子在转录区内 三种帽结构 mRNA5’端帽结构形成过程 初级转录物的切除与多聚腺苷酸化 鸡卵清蛋白mRNA与基因杂交图 鸡卵清蛋白前体mRNA到成熟mRNA的过程 自我剪接与剪接体催化的剪接比较 GroupI内含子剪接 GroupII内含子剪接 四膜虫rRNA的自我剪接 真核生物内含子5’剪接位点和3’剪接位点的保守顺序 SnRNA参与的mRNA前体的剪接 酵母中内含子剪接 (GroupIV型) tRNA的前体加工 大肠杆菌rRNA的前体加工 大肠杆菌初级rRNA 23S区中的二级结构 大肠杆菌30S rRNA前体加工 哺乳动物45S rRNA前体加工 大鼠中降钙素基因转录子的加工 剪接错误造成?贫血病 RNA的编辑(RNA editing) HIV的结构 HIV生活史 反转录病毒的生活史 反转录病毒基因组的结构和基因产物 引起AIDS的病毒HIV的基因组 RNase P 是一个内切核酸酶，由RNA 分子与一个蛋白质分子组成 大肠杆菌中的RNase P由377个核苷酸和13.7kDa小蛋白质组成。单独 RNA具有内切核酸酶作用，因此这个RNA是具催化功能的RNA。 rRNA前体加工 转录后加工不局限于mRNA,真核和原核细胞中rRNA来自较长的前体rRNA E.coli中16S、23S、5S rRNA来自30S rRNA前体 哺乳动物45S前体rRNA转录子在核仁中加工形成18S、28S、5.8S、rRNA 不同加工模式使单个基因产生不同功能蛋白质，一个RNA初级转录物经不同加工产生两种不同激素：降钙素（Calcitonin）在大鼠的甲状腺中和大鼠脑中的降钙素基因相关肽（Calcitonin-gene-related peptide CGRP） 剪接异常引起疾病（β-地中海贫血） ? RNA编辑（RNA editing） 一种特殊的RNA加工形式 初级转录物核苷酸顺序在RNA分子的特定点发生改变，插入或删去核苷酸 反转录 RNA指导的DNA聚合酶是反转录酶 反转录现象的发现是对中心法则的发展 某些反转录病毒引起癌症或AIDS * 真核生物的核中含有三种不同的RNA聚合酶，他们转录不同的RNA产物 RNA聚合酶Ⅰ RNA聚合酶Ⅱ RNA聚合酶Ⅲ 通过对α-鹅膏蕈碱（α-amanitin）不同的敏感程度可以区分RNA聚合酶的作用 真核生物的启动子 RNA聚合酶II识别的启动子 TATA box位于起始点上游25-30 bp 上游调控元件（Upstream Regulatory Element URE） GC box CCAAT box ? RNA聚合酶Ⅰ启动子 含有转录起始点的核心元件和上游控制元件（UCE） RNA聚合酶Ⅲ启动子 上游和下游启动子顺序 爪蟾5SrRNA启动子位于基因内 mRNA前体加工 5’加帽： 三种帽子结构（Cap 0,CapⅠ,CapII） 3’切除与多聚腺苷酸化： 加尾信号AAUAAA 加poly(A)尾 甲基化 在5’-RRACX-3’(R=purine)顺序中腺嘌呤甲基化（m6A） 真核生物基因是断裂基因（split gene） 真核生物基因的核苷酸顺序不全部反映到蛋白质一级结构上，有部分顺序不是蛋白质所必须或者说真核生物基因中编码序列被称为内含子序列分割成几段，这样的基因称为断裂基因 内含子（intron）相当于前体mRNA上切去部分的DNA 外显子（exon）相当于前体mRNA保留下来的DNA ?-珠蛋白的mRNA与基因杂交 ?-珠蛋白的pre-mRNA与基因的杂交 断裂基因转录出包含全部顺序的初始转录物，称为前体mRNA。通 过剪接（splicing）作用除去不必要部分(内含子)剩下部分(外显子) 连接成为成熟mRNA 内含子剪接方式 四种剪接方式 groupⅠ 需鸟苷或鸟苷酸作为辅助因子，鸟苷酸3’-OH作为亲 核供体 group II　　内含子中腺苷酸残基2’位羟基作为亲核供体 去除的内含子形成套马索（Lariat）结构 共同特点 group Ⅰ和group II 内含子有自我剪接功能 核酶 (Ribozyme) 具有催化功能的RNA 分子，能催化特殊的生物化学反应 1982年，Cech在研究四膜虫大亚基rRNA剪接过程中发现内含子能自身