第09章酶促反应动力学-物理与电子科学学院-楚雄师范学院.ppt

台州学院生命科学与医药化工学院 柯世省 （一）抑制程度的两种表示方法 1、相对活力 ★相对活力分数 ★相对活力百分数 2、抑制率 ★抑制分数 ★抑制百分数 楚雄师范学院化学与生命科学系 范树国 （二）抑制作用的类型 1、不可逆的抑制作用 抑制剂与酶活性中心（外）的必需基团共价结合，使酶的活性下降，无法用透析、超滤等物理方法除去抑制剂而使酶复活。 2、可逆的抑制作用 抑制剂与酶蛋白非共价键结合，可以用透折、超滤等物理方法除去抑制剂而使 酶复活。 楚雄师范学院化学与生命科学系 范树国 （1）竞争性抑制（Competitive inhibition） ?抑制剂具有与底物类似的结构，竞争酶的活性中心，并与酶形成可逆的EI复合物，阻止底物与酶结合。 可以通过增加底物浓度而解除此种抑制。 （2）非竞争性抑制（noncompetitive inhibition） 底物和抑制剂可以同时与酶结合，但是，中间的三元复合物ESI不能进一步分解为产物，因此，酶的活性降低。 抑制剂与酶活性中心以外的基团结合，其结构可能与底物无关。不能通过增加底物浓度的办法来消除非竞争性抑制作用。 （3）反竞争性抑制 酶只有在与底物结合后，才能与抑制剂结合。 E+S→ES+I →ESI≠ P 常见于多底物的酶促反应中 （三）可逆抑制作用与不可逆抑制作用的鉴别 1、通过透析、超滤、凝胶过滤等 2、通过v-E速度曲线 [E] v 1 2 3 (1) 反应体系中不加I。 (2) 反应体系中加入一定量的不可逆抑制剂。 (3)反应体系中加入一定量的可逆抑制剂。 楚雄师范学院化学与生命科学系 范树国 [E] v 不可逆抑制剂的作用 [E] v 可逆抑制剂的作用 [I ]增高→ [I ]增高 3、通过可逆抑制剂的动力学曲线可以区分三种可逆抑制作用 楚雄师范学院化学与生命科学系 范树国 （四）可逆抑制作用动力学 1、竞争性抑制 动力学方程： （Ki为EI的解离常数） ★Vmax不变; Km变大，而且随[I]浓度的增大而增大。 相对活力： 抑制分数： ★抑制程度决定于[I]、[S]、Km和Ki 楚雄师范学院化学与生命科学系 范树国 2、非竞争性抑制 动力学方程： ★Km不变，Vmax降至Vmax/（1+[I]/Ki） 相对活力： 抑制分数： ★抑制程度决定于[I]和Ki ，与底物的Km和[S]无关 楚雄师范学院化学与生命科学系 范树国 * * 第九章 酶促反应动力学 一、化学动力学基础 二、底物浓度对酶反应速率的影响 三、酶的抑制作用 四、温度对酶反应速度的影响 五、pH对酶反应的影响 六、激活剂对酶反应的影响 楚雄师范学院化学与生命科学系 范树国 一、化学动力学基础 化学反应的两个基本问题：（1）反应进行的方向、可能性和限度；（2）反应进行的速率和反应机制。 （一）反应速率及其测定 反应速率是以单位时间内反应物或生成物浓度的改变来表示。用瞬时速率表示反应速率： v =dc/dt 反应速率的测定实际上就是测定不同时间的反应物或生成物的浓度。 楚雄师范学院化学与生命科学系 范树国 （二）反应分子数和反应级数 1. 反应分子数：在反应中真正相互作用的分子的数目。 单分子反应，双分子反应，…… 判断一个反应是单分子反应还是双分子反应，应先了解反应机制，即反应过程中各个单元反应是如何进行的。 2. 反应级数：根据实验结果，整个化学反应的速率服从哪种分子反应速率方程式，则这个反应即为几级反应。 一级反应，二级反应，……，零级反应。 楚雄师范学院化学与生命科学系 范树国 （三）各级反应的特征 1. 一级反应 凡是反应速率只与反应物的浓度的一次方成正比的，这种反应就称为一级反应。 速率常数与半衰期成反比，半衰期与反应物的初浓度无关。 2. 二级反应 凡是反应速率与反应物浓度二次方（或两种物质浓度的乘积）成正比的，这种反应就称为二级反应。 半衰期与初浓度成反比。 3. 零级反应 凡是反应速率与反应物浓度无关而受它种因素影响而改变的反应。 半衰期与初始浓度成正比。 楚雄师范学院化学与生命科学系 范树国 二、底物浓度对酶反应速率的影响 （一）中间络合物学说 1903年，Henri用蔗糖酶水解蔗糖的实验 在低底物浓度时, 反应速度与底物浓度成正比，表现为一级反应特征。 当底物浓度达到一定值，反应速度达到最大值（Vmax），此时再增加底物浓度，反应速度不再增加，表现为零级反应。 楚雄师范学院化学与生命科学系 范树国 酶与底物的中间络合物学说（Henri和Wurtz） S+E ES P+E 中间产物假说证据： （