蛋白质合成2014—20151.pptVIP

分子生物学 大连大学生物工程学院 迟彦 第六章 蛋白质生物合成(Protein biosynthesis) 4.4.5 蛋白质前体的加工 N-端fMet或Met的切除 二硫键的形成：两个半胱氨酸氧化生成胱氨酸 特定氨基酸的修饰 切除新生肽链中的非功能片段 N-端fMet或Met的切除 原核生物的肽链，其N-端不保留甲酰基，大约半数蛋白由脱甲酰酶（deformylase）除去甲酰基，留下Met作为第一个氨基酸；在原核及真核细胞中fMet或者Met一般都要被除去，此是由氨肽酶（amino peptidase）水解来完成的。 二硫键的形成 mRNA中没有胱氨酸密码子，而不少蛋白质都含有二硫键，这是蛋白质合成后通过两个半胱氨酸的氧化作用生成的。 二硫键的正确形成对稳定蛋白的天然构象具有重要作用 特定氨基酸的修饰 磷酸化，糖基化，甲基化，乙酰化，羟基化，羧基化 氨基酸侧链的修饰作用包括磷酸化（如核糖体蛋白质）、糖基化（如各种糖蛋白）、甲基化（如组蛋白、肌肉蛋白质）、乙酰化（如组蛋白）、羟基化（如胶原蛋白）和羧基化等，图4-23是生物体内最普通发生修饰作用的氨基酸残基及其修饰产物。 磷酸化 由蛋白激酶催化 丝氨酸、苏氨酸、酪氨酸 甲基化 由N-甲基转移酶催化 细胞质内 Arg 、His、Gln 糖基化 内质网中糖基化酶催化 分泌蛋白和膜蛋白几乎都是糖基化蛋白 切除新生肽链中的非功能片段 图4-25 蜂毒蛋白只有经蛋白酶水解切除N-端的22个氨基酸以后才有生物活性。该胞外蛋白酶只能特异性切割X-Y2肽，其中X是丙氨酸，天门冬氨酸和谷氨酸，Y是丙氨酸或脯氨酸。 4.4.6 蛋白质的折叠 分子伴侣：能够在细胞内辅助新生肽链正确折叠的蛋白质。 两类分子伴侣家族：热休克蛋白 伴侣素 伴侣分子在新生肽链折叠中主要通过防止或消除肽链的错误折叠，增加功能性蛋白质折叠产率来发挥作用，而并非加快折叠反应速度。 4.4.7 蛋白质合成的抑制剂 阻止mRNA与核糖体结合（氯霉素） 阻止AA-tRNA与核糖体结合（四环素） 干扰AA-tRNA与核糖体集合而产生错读（链霉素，新霉素，卡那霉素） 嘌呤霉素是AA-tRNA的结构类似物，不需要延伸因子就可以结合在核糖体的A位上，抑制AA-tRNA的进入。它所带的氨基与AA- tRNA上的氨基一样，能与生长中肽链上的羧基生成肽键，这个反应的产物是一条3′羧基端挂了一嘌呤霉素残基小肽，肽酰嘌呤霉素随后从核糖体上解离出来，所以它是通过提前释放肽链来抑制蛋白质的合成的。 4.5 蛋白质运转机制 不同功能的蛋白质离开核糖体后，被输送到细胞质、细胞核、内质网、溶酶体、线粒体、叶绿体等各个部分，行使其功能。 表4-13 几类主要蛋白质的运转机制 根据蛋白质的定位可以将其大致分为两类： 非膜结合型蛋白质: 非膜结合型蛋白质在核糖体(游离Free)中合成后被释放到胞质中。有些蛋白质从核糖体上释放后停留在胞质中；为了转运到其专一的位点，还需要一个适当的信号，可以使其组装为大分子结构或被转运系统识别。 膜结合型蛋白质： 合成这些蛋白质的核糖体结合在内质网上，使新生肽链能在翻译的过程中进入膜内，然后被高尔基体中的转运系统转运到它们特定的位点。 翻译后转运的蛋白质在核糖体上合成后被释放到胞质中去，具有信号序列的被定位到各个细胞器(如细胞核、线粒体等)中。 翻译和转运同时进行的蛋白(共转运蛋白)在合成过程中与内质网相连，所以它们地核糖体是“膜结合”的。膜结合型蛋白穿过内质网，经过高尔基体，接着跨过细胞膜。如果这些蛋白有驻留信号，则会在此旁路的各个环节中停留，或被定位于各种细胞器(如溶酶体、内吞体等)。 4.5.1 翻译运转同步机制 信号肽假说——蛋白质定位的信息存在于该蛋白质自身结构中，通过与膜上特殊受体的相互作用得以表达。 信号肽——在起始密码子后，有一段编码疏水性氨基酸序列的RNA区域，这段氨基酸序列就称为信号肽。长度一般在13-36个残基之间，有三个特点： 信号肽特点 ①核糖体组装、翻译起始； ②N端信号肽序列的翻译（50-70aa）； ③SRP与核糖体、GTP以及带有信号肽的新生蛋白质结合，肽链延伸暂时终止； ④核糖体-SRP复合物与膜上的受体相结合； ⑤多肽合成才恢复进行，GPT水解，释放SRP； ⑥肽链重新开始延伸并不断向内腔运输； ⑦信号肽被切除； ⑧多肽合成结束，核糖体释放。 SRP同时识别正在合成需要通过内质网膜进行转运的新生肽和自由核糖体，同时导致了该多肽合成的暂时终止。 SRP-信号肽-多核糖体复合物即被引向内质网膜并与SRP受体结合。只有SRP与受体结合，多肽合成才恢复进行。 SRP与受体结合很可能导致受体聚集而