原子力显微术研究生物样品的弹性.ppt

原子力显微术研究生物样品的弹性 细胞力学及其实验方法 实验方法 移液管吸入法 利用闪烁或者动态反射干涉对照谱研究 利用光学钳（红外激光阱）的方法 扫描声学显微镜研究分布在细胞表面的力 磁分析装置和剪切流量测量技术 表面力仪 对细胞进行挤压、刺探的方法 原子力显微术研究活细胞的性质 细胞弹性的测量 赫兹模型 需要开展的工作 * 王艳霞 2002年12月14日 细胞力学及其实验方法 ?原子力显微术研究活细胞的性质 赫兹模型 细胞的弹性研究 主要内容： 作为生命基本单元的细胞，是一个生物学的复合系统。测量细胞的弹性，在AFM面世之前就受到广泛的关注。迅速发展的细胞生物学表明，细胞内部的细胞骨架(cytoskeleton)是高度有组织的网状分子细丝。这种动态的网状组织是各种细胞功能的基础，这些细胞功能之中包括细胞的粘附和细胞的运动。对细胞结构的组分生化辨识和描述，是定量测量细胞骨架的物理性质的基础。细胞骨架是一个由肌动蛋白细丝（6―10nm）、间质细丝（7－11nm）和细胞的微管丝（25nm）组成的有机结构。细胞骨架的力学性质对于细胞的形状、细胞的扩展、细胞的蠕变、细胞的极性和细胞的分裂等其他的功能都有相当重要的决定性作用，已逐渐成为业内的共识。与悬浮细胞不同，附着细胞的变形在很大程度上决定于细胞骨架，同时还受到细胞与周围环境特别是细胞与胞外基体（ECM）之间的力学作用及生化作用的影响。 正如许多工程材料一样，有外力作用在细胞表面时，细胞也会发生形变。这种变化用细胞的力学性质描述。细胞的力学性质决定于细胞的组成、细胞的结构以及细胞与周围物质的相互作用。影响细胞的力学性质的外部因素千变万化。 细胞的形变性质还受到细胞内部的某些特定结构的控制，生物细胞的力学性质会影响细胞的整体形变。 与其他物质不同，外力作用的同时也会产生细胞的生理反应。许多实验发现正常细胞与病态细胞的生存条件与他们周围的力学环境有关。细胞力学中的一个研究热点就是使用外力调节细胞的某些功能。 这方面的工作包括：对生物组织的细胞施加何种形式的力，能够使得细胞黏附于细胞外部的基体(cell-extra cellular matrix)；可以完成这种黏附的力的量值有多大；这些力如何在细胞内部进行转换和分布；以及它们是如何进行生物信息的传导、如何产生生理反应等等。这个方向的深入研究包括确定具体分子对机械力的转换、感知过程的途径（生理过程）、判别多个生物化学过程的层叠、确定各种分子的性质等；还可以研究细胞内部的力学调控机理，包括对细胞骨架的研究。 目前，细胞力学的实验研究方法有：移液管吸入法（micropipette aspiration)、动态反射干涉对照法(flicker)、光学钳(optical tweezers)、 扫描声学显微镜(scanning acoustic microscope)、挤压刺探法(poking)等，测量生物样品的表面间相互作用和弹性的方法还有表面力仪等等。这些方法多数是相对较大面积内的平均特性，从而影响这些技术的空间分辨率。空间分辨率的限制，影响了对细胞力学性质的研究 。 AFM的横向分辨率比上述方法都高。利用AFM对细胞的力学性质的研究方法类似于，使用玻璃纤维压陷细胞的某个局部，对细胞进行挤压、刺探的方法。 1989年，Young and Evans在Biophysical Journal 56: 139–149（Cortical shell-liquid core model for passive low of liquid-like spherical cells into micropipettes）对细胞的结构和变形给出了测量方法和定量分析； 1996年，J. Shao和R. M. Hochmuth等，在Biophysical Journal 71:2892–2901（Micropipette suction for measuring piconewton forces of adhesion and tether formation from neutrophil membranes）测量了细胞膜在皮牛顿量级的作用力； 1988年，Theret等，在the application of a homogeneous half-space model in the analysis of endothelial cell micropipette measurements，Journal of mechanical Engineering 110: 190－199中对上皮细胞进行了研究; 1990年，Sato和Theret等，在Application of the micropipette technique