一株乙型肝炎病毒鼠单抗的人源化及生物学活性鉴定.pdf

第 56卷 第 1期 厦门大学学报 (自然科学版) Vo1．56 NO．1 2017年 1月 JournalofXiamenUniversity(NaturalScience) Jan．2017 一 株 乙型肝炎病毒 鼠单抗的人源化及生物学活性鉴定 徐灵杰 ，罗文新 ，张 娟 ，周 兵 ，张天英 ，胡耀凯 ，袁 权。，夏宁邵 (1．厦门大学 生命科学学院 国家传染病诊断试剂及疫苗工程技术研究中心，2．厦门大学公共卫生学院，福建 厦门 361102) 摘 要 ：乙型肝炎病毒(HBV)感染是全球最为重要的公共卫生问题之一，目前临床上治疗 HBV的药物在彻底清除病毒 方面并没有取得满意的结果，因此迫切需要发展能有效清除病毒，尤其是能有效清除乙肝表面抗原 (HBsAg)或大幅度 降低HBsAg血清学水平的创新性治疗药物．筛选到一株针对 HBV和 HBsAg上一个特定表位的鼠单抗 129G1，它能持 续有效地清除转基因小鼠体 内的HBV及 HBsAg，有发展为治疗性抗体药物的潜力．为了降低 129G1的免疫原性 ，采用 互补决定区(cDR)移植 的方式，利用噬菌体抗体库技术对这个 鼠单抗进行 了人源化 ，最终得到人源化抗体．人源化抗体 与 HBsAg的结合活性与嵌合抗体相当，抗体质量浓度为 1I45ffg／mL时介导 THp-1细胞吞噬率达到 5O ．在 HBV转 基因小 鼠的实验 中，获得 的 129G1人源化抗体能持续有效地抑制血清中HBVDNA及清除HBsAg． 关键词 ：乙型肝炎病毒；噬菌体抗体库 ；抗体人源化；抗体药物 中图分类号：Q511 文献标志码 ：A 文章编号 ：0438—0479(2017)01—0072—07 乙型肝炎病毒 (HBv)感染是全球最为重要 的公 到抗病毒作用口]．HBV感染宿主后产生 的抗体主要是 共卫生问题之一 ，据世界卫生组织统计数据 显示 ，全 anti—HBs、anti—HBe和 anti—HBc，其中 anti—HBs属于 球约有 2O亿人感染过 HBV，约占世界总人 口的 I／3， 能够有效阻止病毒感染细胞的中和抗体 ，这也表明针 且其中有 3．6亿人最终发展成为慢性感染 [1]，每年有 对 HBsAg的抗体可以作为有效治疗慢性 乙肝 的药 将近 100万人死于 HBV感染及其所引发 的肝脏疾 物．目前高效价乙肝免疫球蛋 白(HBIG)已广泛应用于 病 [3]，HBv 的 高流 行 区人 群 中乙肝表 面抗 原 阻断HBV的母婴垂直传播等，但 HBIG直接用于治 (HBsAg)阳性率通常在 8 ～20 L5]．目前 临床上治 疗慢性 HBV感染并未见明显的疗效 ，且其存在着血 疗 HBV 的药物主要包括干扰素类和核苷类似物．干 浆来源有限、性质不稳定等潜在的安全问题． 扰素类药物包括普通干扰素及聚乙二醇干扰素，使用 本实验室 (第一单位 ，下同)获得一株鼠源单克隆 后仅有 7．8 的患者达到 HBsAg血清转换 [5]，同时因 抗体 129G1，它是针对 HBV表面抗原一个特定表位 为其可能引发明显 的副作用而不能用于长期的治疗 ； 的抗体 ，能有效清除转基 因小 鼠体内的 HBV及 HB- 核苷类似物包括拉米夫定、替 比夫定等，但 使用后 sAg．为降低免疫源性 ，采用互补决定 区(CDR)移植 的 方式嘲，利用噬菌体抗体库技术对该 鼠单抗进行了人 HBsAg血清转换率极低 ，用药 2年后转换率不到 源化改造 ，最终得到一株人源化抗体 ，在 HBV转基因 2 ，接近 自然阴转率，同时它的使用也存在长期治疗 小 鼠中能有效地抑制 HBVDNA、清除 HBsAg，将来 过程 中会增强病毒抗药性的问题I6]．