小菜蛾PxALP1基因的克隆与生物信息学分析.pdf

山东农 业 科 学 2017，49(1)：7～12 ShandongAgriculturalSciences DOI：10．14083／j．issn．1001—4942．2017．1．002 小菜蛾PxALP1基因的克隆与生物信息学分析 胡霞，刘晓琳，白义川，徐维红，刘佰明，邹德玉，许静杨，谷希树 (天津市植物保护研究所，天津 300384) 摘要：小菜蛾是一种世界性分布的重要农业害虫，也是最早对无公害生物农药 Bt毒素产生抗性的种群之 一 。 已有研究显示，在多种昆虫体内碱性磷酸酶是Bt毒素蛋白的直接受体 ，但在小菜蛾 中，碱性磷酸酶的编 码基因及其生物学功能尚极少有人研究。本研究克隆了小菜蛾PxALP1基因的开放阅读框 (ORF)，并推导出 其氨基酸序列。经SMART网站分析，发现该蛋白质在第79～513位氨基酸残基区域存在典型的alkPPc(alka- linephosphatasehomologues)结构域；经 SWISS—MODEL同源模建预测蛋白质三级结构，发现该蛋白质具有典 型的跨膜结构域，说明它是一个潜在的膜结合碱性磷酸酶。通过进化树分析 ，发现小菜蛾 PxALP1与鳞翅 目 昆虫家蚕膜结合碱性磷酸酶的亲缘关系最近，BLAST比对发现PxALP1与家蚕 BmAlpm在氨基酸序列上的一 致性 (identity)为36．3％，相似性 (similarity)为50．3％，说明二者之间具有较好的进化保守性。 关键词：小菜蛾 ；ALP1；碱性磷酸酶；生物信息学分析 中图分类号：$433．4：Q785 文献标识号：A 文章编号：1001—4942(加17)01—0007—06 CloningandBioinformaticAnalysisof PxALPlGenefrom P te／／axylosteUa HuXia，LiuXiaolin，BaiYichuan，XuWeihong，LiuBaiming，ZouDeyu，XuJingyang，GuXishu (TianjinInstituteofPlantProtection，Tianjin300384，China) Abstract Thediamondbackmoth，Plutellaxylostella(L．)，isoneoftheworldwideagriculturalpests ofcruciferousvegetables，and isalsooneoftheearliestpopulationswhich produceresistancetopollution— freebiological pesticideBttoxin．Themembraneboundalkalinephosphatasehasbeenshowntobeadirectre- ceptorofBttoxinproteininmanyinsectsaccordingtopreviousstudies．However，thecodinggenesandbio— logicalfunctionsofPlutellaxylosteUaalkalinephosphataseisrarelyknown．In thisstudy，theopenreading frame(ORF)ofPxALP1genewasclonedandtheproteinprimarystructurewasdeduced．AclassicalkPPc (alkalinephosphatasehomologues)domainwasfoundinthe79th～513thaminoacidresiduebySMARTanal- ysis．andamembranebounddomainwasf0undthroughSWISS—MODELhomologymodelconsturction．Both ofthem indicatedthatPxALP1wasapotentialmembraneboundalkalinephosphatase．Phylogeneticanalysis showedthatdiamondbac