附录2抗原的制备.docVIP

抗原的制备方法 细胞性免疫原的制备 1. 红细胞抗原的制备 取静脉血，加肝素的生理盐水，轻轻摇匀，离心2000r/min，红细胞被压积于管底，弃去上清，用生理盐水洗3次。 2. 白细胞抗原的制备 抗凝血的试管中加入全血，37℃静置30-60min，自然沉降后，血液分为三层，上层为淡黄色血浆，底层为红细胞，中间有一白细胞薄层，用尖吸管吸取，移入另一试管中，加无钙镁的缓冲液，离心，洗涤制得。 组织细胞抗原 在无菌条件下，取组织，切成小块，用无菌缓冲液洗涤，再用25%胰蛋白酶水解，4℃过夜（37℃，30-60min） 2.蛋白质抗原的制备 离心分离法 盐析法 分子筛效应 离子交换色谱 半抗原免疫原的制备 常见的半抗原种类及性质 属于半抗原的物质是低分子量的化学物质。如多糖、多肽、甾体激素、脂肪酸、类脂质、核苷酸、药物（包括抗生素）以及其他化学物品。 载体的种类和常见载体的性质 载体有蛋白质类，多肽聚合物，大分子聚合物和某些颗粒。 常用的蛋白有BSA，HSA。 多肽有多聚赖氨酸（poly-L-lysine） 半抗原甾体连接方法 原理：带有游离氨基酸或游离羧基以及2种基团都有的半抗原，可直接与甾体连接。其他不带有游离氨基酸或羧基的半抗原须加以适当的改造，使其转变为带有游离氨基酸或羧基的衍生物，才能与载体连接。 连接方法 ⑴碳化二亚胺 ⑵戊二醛法 ⑶氯甲酸异丁脂法 ⑷琥珀酸酐法 ⑸重氮法 ⑹