难治性癫痫的分子遗传研究.doc

难治性癫痫的分子遗传研究 癫痫的发生机制未明，可能是多因素过程，既包括各种环境因素，又包括遗传因素。难治性癫痫的遗传因素有染色体数目和结构的改变及基因突变，基因突变主要是指单核苷酸多态(singlenucleotidepolymorphisms，SNPS)和插入/缺失多态，其中以SNPS为切入点的候选基因研究是难治性癫痫分子遗传学研究的主要策略。难治性癫痫的分子遗传学已取得了不少进展，现做简要综述如下。 一、多药耐药基因 由于大脑存在血脑屏障(bloodbrainbarrier，BBB)和血脑脊液屏障(bloodCSFbarrier，BCB)，抗癫痫药进入大脑发挥作用首先要受到这些屏障的被动限制。除此之外，大脑还通过载体即转运蛋白将药物外向性排出脑组织，起到主动防卫作用，限制了抗癫痫药在脑内的积聚与难治性癫痫有关的转运蛋白有P-糖蛋白(Pglycoprotein，P-gp)、多药耐药相关蛋白(multidrug-resistanceassociatedprotein，MRP)、主要有穹隆蛋白(majorvaultprotein，MVP)、乳癌耐药蛋白(breastcancerresistanceprotein，BCRP)等。 P-gp为细胞膜上固有的一大类跨膜蛋白，由1280个氨基酸组成，其具体的分子作用机制是依靠ATP的转化能量，像“泵”一样进入大脑或神经元的抗癫痫药物或细胞毒性物质泵出。星形胶质细胞是血脑屏障重要组成部分，其细胞膜内P-gp将进入脑实质的抗癫痫药泵出，构成主动对抗药物作用的第一道防线;神经元的P-gp可使进入神经元的抗癫痫药被重新泵出，构成了主动对抗药物作用的第2道防线，最终使真正作用于药物“靶点”的抗癫痫药物量下降。国外研究发现在人类难治性癫痫外科治疗切除的脑组织中有P-gp的过度表达，国内学者用免疫细胞化学法和流式细胞术对诊断明确的癫痫患者的P-gp进行检测，发现有40%难治性癫痫患者大脑毛细血管、星形胶质细胞和神经元中均有P-gp表达，而非难治性癫痫患者P-gp表达较少或无表达，动物实验也得出类似的结果。 编码P-gp的多药耐药基因1(multidrug-resistancegenel，MDR1)是第一个被发现可能与难治性癫痫有关的基因，它位于第7号染色体长臂即7q21，至少有50个SNPs和插入/缺失多态，其中外显子26的C3435T多态外显子21的G2677T/A多态、启动子的T-129C多态影响P-gp的表达水平，是MDR1的研究重点。Siddiqui等研究认为C3435T多态与癫痫耐药有关，与非耐药性癫痫相比，耐药性癫痫CC基因型更可能高于TT基因型，而CT基因型的比率无差异;与正常人相比，无论癫痫类型如何，或用何种抗癫痫药治疗耐药性癫痫MDR1基因C3435T多态CC基因型频率明显升高，而TT基因型频率明显降低，而非耐药性癫痫与正常人相比无明显差异。 之后英国学者也发现基因型CC在癫痫耐药组更常见。Hung等对108例耐药性癫痫、223例控制良好的癫痫和287例正常对照者的MDR1基因进行研究，发现外显子12的C1236T多态，外显子21G2677T多态和外显子26C3435T多态之间存在非常显著的连锁不平衡，基因型分析显示CGC，TGC和TTT基因型患者很有可能发生耐药，而TTC/TTC，TTC/CGT，TTC/TGT，CGT/CGT和TGT/CGT基因型患者的癫痫发作可能易于控制，结论认为对C1236T，G2677T和C3435T这3个基因位点的检测可能有助于难治性癫痫的预测。然而澳大利亚的一项609例样本的协作研究未能得出阳性结果，韩国的一项最新研究显示：MDR1基因的C3435T多态G2677T/A多态与难治性癫痫无关。至于其他转运蛋白的编码基因与难治性癫痫的关系，至今罕见报道。 二、载脂蛋白E基因 载脂蛋白E(ApolipoproteinE，ApoE)是多种脂蛋白的载体.对人体包括大脑内的胆固醇和脂质代谢起重要作用，在神经系统由星形胶质细胞、小胶质细胞合成，然后通过低密度脂蛋白、极低密度脂蛋白受体进入神经元，另外，最新研究发现ApoE也可产生于神经元，在调节学习和记忆、结构可塑性、发育、维持生长和老化过程中神经细胞膜的完整及惊厥性脑损伤等方面具有重要作用。ApoE基因位于人类19号染色体，由3597个核苷酸组成，含有4个外显子及3个内含子，ApoE异构体是由3个等位基因ε-2、ε-3、ε-4编码。Sporis等采用前瞻性病例对照研究探讨ApoE基因多态性与部分性复杂发作癫痫耐药的关系，发现难治性癫痫与ApoEε-4等位基因有关，而与ε-2、3无明显相关。有作者还发现ApoEε-4等位基因与难治性癫痫的间歇期长短有关，