HPLC法测定骨质宁搽剂中盐酸小檗碱的含量_0.docVIP

HPLC法测定骨质宁搽剂中盐酸小檗碱的含量 作者：徐世芳 陈爱瑛 姜丽霞 【摘要】 ［目的］建立高效液相色谱法测定骨质宁搽剂中盐酸小檗碱(C20H18ClNO4)含量的 方法 。 ［方法］C18色谱柱，流动相为乙腈—50mmol·L-1NaH2PO4水溶液（磷酸调PH=2.5）（2575），流速1.0mL·min-1,室温, UV 348 nm检测。［ 结果］盐酸小檗碱在 0.106～0.530μg（n=5）范围内线性关系良好（r=0.9999）；方法精密度RSD为0.7%（n=6）。4批样品盐酸小檗碱的含量分别为19.11、18.81、18.83、18.92mg/100mg。［结论］方法专属性强、简便、准确；为该药提供了切实可行的质控方法。 【关键词】 骨质宁搽剂;盐酸小檗碱;含量测定;HPLC 　　Abstract:［Objective］To develop an HPLC method for the determination of berberine hydrochloride in GuZheNing liniment.［Methods］ The chromatographic system consisted of Dimonsil C18 column and mobile phase of acetonitrile—50mmol·L-1 sodium dihydrogen phosphate (adjusted PH to 2.5 with H3PO4) (25∶75). The flow rate was 1.0 mL·min-1, and the detective wavelength was at 348 nm.［Results］The calibration curve was linear in the range of 0.106～0.530 μg（n=5）.The method was proved to be repeatable with RSD 0.7%（n=6）.4 batches of sample were analyzed and the Berberine Hydrochloride contents were 19.11, 18.81, 18.83, 18.92mg/100mg, respectively.［Conclusion］The method is selective, simple and accurate, and could be used for the quality control of this preparation. 　　Key words: GuZhiNing , Berberine Hydrochloride, assay, HPLC 　　盐酸小檗碱有较强的抗菌等药理作用，为黄连、黄柏、功劳木等中药材中的主要有效成分，在中药成方制剂质量标准中较多的选用为含量控制指标［1］。骨质宁搽剂是由云母石、黄连、枯矾组成的中药成方制剂，其已有国家标准（标准编号：WS3—B—3945—98）的含量测定项是采用薄层色谱扫描法。在此标准的基础上我们进行了本注册药品的系列质量 研究 ，并建立了用高效液相色谱法测定盐酸小檗碱的含量，方法专属性强、操作简便、灵敏、准确。为该药提供了切实可行的质控方法。 　　1 仪器与试药 　　美国WATERS 高效液相色谱仪，510泵，484紫外检测器；N2000色谱工作站（浙江大学）；盐酸小檗碱对照品（ 中国 药品生物制品检定所：供含量测定用，批号110713－200208）。骨质宁搽剂：规格为每瓶50mL；乙腈为色谱纯，水为重蒸水，其它试剂均为 分析 纯。 　　2 实验方法 　　2.1 色谱条件及系统适用性试验 　　色谱柱：Dimonsil C18，5μm，4.6mm×150mm，室温；流动相：乙腈-0.05mol/L磷酸二氢钠溶液（用磷酸调节pH至2.5）（25：75）；流速为1.0mL·min-1； 理论 板数以盐酸小檗碱 计算 为7000；主峰与前相邻峰的分离度为2.4；UV检测波长为348 nm；对照品溶液进样10μL, 供试品溶液进样5—10μL，外标法定量。 　　2.2 溶液的制备 　　2.2.1 对照品溶液的制备 精密称取盐酸小檗碱对照品适量，用甲醇配制成浓度为200μg ·mL-1的溶液，再用流动相稀释10倍（1→10），配制成浓度为20μg·mL-1的溶液。 　　2.2.2 供试品溶液的制备 精密量取本品2mL，置10mL量瓶中，加入流动相至刻度，摇匀，0.45 μm微孔滤膜滤过，即得。 　　3 方法学考察 　　3.1.1 专属性 按处方制备不含黄连的阴性样品，按拟定的方法处理样品并测定，在小