基于NLRP3炎性体信号通路研究桂枝芍药知母汤对尿酸钠诱导大鼠中性粒细胞炎性信号表达影响.pdfVIP

·170 · 中国药物与临床 年 月第 卷第 期 ， ２０１6 ２ １6 ２ Ｃhinese Ｒemedies Ｃlinics February ２０１6,Vol.１6,Ｎo.２ 基于ＮＬＲＰ３ 炎性体信号通路研究桂枝芍药知母汤 对尿酸钠诱导的大鼠中性粒细胞炎性信号表达的影响 房树标 王永辉 李艳彦 周 然 【摘 要】 目的 基于核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白 （ ）炎性体信号通路观察桂枝芍药知 ３ ＮＬＲＰ３ 母汤（ ）对尿酸钠诱导的大鼠中性粒细胞炎性信号表达的影响，以期探明其抗炎的药效作用机制。方法 健康 ＧＤ 雄性 大鼠 只，按体质量分为 组，每组 只， 高、中、低剂量组（，， ）、秋水仙碱阳性对照组（ SＤ ３０ ５ 6 ＧＤ 4 ８ １6 g/kg ３× -4 ）均灌胃给药，正常组给予等容积的蒸馏水，每天 次，连续给药 。最后 次灌胃 后，所有大鼠乙 １０ g/kg １ 7 d １ １ h 醚麻醉，取血清备用。 雄性大鼠 只，参照文献方法提取分离大鼠中性粒细胞，接种培养。细胞试验分为 个 SＤ ２０ ２ 实验组（不加受体抑制剂，加 受体抑制剂），每个实验组均含 个组，正常对照组加入正常大鼠血清，模型 ＮＡＬＰ３ 6 对照组，高、中、低剂量组，秋水仙碱组全部滴加 的尿酸钠混悬液造模，同时滴加含药血清，置于 细 ２００ mg/Ｌ ＣＯ２ 胞培养箱中，孵育 取出。酶联免疫吸附实验（ ）法测定炎性因子白细胞介素 （ ）、 、肿瘤坏死 １２ h EＬISＡ -１β IＬ-１β IＬ-6 因子 （ ）的表达， 蛋白质互作 （ ）方法检测核因子 （ ）活性；蛋白印迹法检测 -α TＮF-α ＤＮＡ- EＬISＡ ＤＰI-EＬISＡ -κB ＮF-κB 凋亡相关斑点样蛋白（ ）、胱天蛋白酶 （ ）信号衔接蛋白表达水平；反转录聚合酶链反应（ ＡSＣ -１２ casｐase-１２ ＲT- ＰＣＲ ）观测ＮＬＲＰ３ 炎性体mＲＮＡ 的表达。结果 细胞造模１２ h 后，与正