黄芪在治疗超敏反应中的影响.docxVIP

黄芪对豚鼠Ⅰ型超敏反应的影响 专业： 临床医学专业 班级：2013级13班 刘近霞 4112320008 高瑞 6111060104姜红燕 4113080005 张月华 5113010637 杨月敏 赵慧 5113010638 米高楠 4113430057 朱纪刚 【摘要】一、目的:观察黄芪对豚鼠Ⅰ型超敏反应早、晚期及细胞因子的影响。 二、方法:以马血清致敏豚鼠作为Ⅰ型超敏反应的动物模型。 三、结果:通过病理观察发现，中药黄芪既能抑制毛细血管扩张、通透性增强、腺 体分泌增加、平滑肌收缩等超敏反应的早期病理改变，也能抑制以嗜酸性粒细胞浸润为主的晚期病理改变，效果显著。应用ELISA检测IL-4 IFN 在豚鼠血清中的含量。致敏组和实验用药组IL-4浓度均值为31.22pg/ml和14.40pg/ml（p＜0.05），而IFN的均值分别为10.32pg/ml和23.14pg/ml（p＜0.05）IgE也随之明显降低，从而阻止了Ⅰ型超敏反应的发生。 四、结论：中药黄芪对豚鼠Ⅰ型超敏反应有较好的治疗作用。【关键词】Ⅰ型超敏反应;黄芪;IL-4;IFN【引言】 过去的实验研究发现中药黄芪对Ⅰ型超敏反应有一定的治疗效果，但具体机制不明。由于大量IgE产生是Ⅰ型超敏反应的关键环节，要想从根本上解决Ⅰ型超敏反应发生的问题，就必须从抑制IgE的过量产生入手。Th2细胞分泌的IL-4是B细胞唯一的IgE类转换因子，加强超敏反应；Th1细胞分泌的IFN可抑制IL-4的产生，抑制超敏反应。中药黄芪能在细胞因子水平对Ⅰ型超敏反应进行调节，使豚鼠Th2和Th1细胞的功能有所改善，IL-4分泌减少抑制IgE过量生成，对Ⅰ型超敏反应达到治疗作用，是目前较有应用前景的药物。本实验将豚鼠分为致敏组和用药组，用药组豚鼠淋巴细胞上清中IL-4浓度明显低于致敏组，而IFN明显高于致敏组。提示该药可促进Th1产生IFN，抑制Th2产生IL-4。从而了解了中药黄芪缓解Ⅰ型超敏反应的具体机制。超敏反应（hypersensitivity）是机体受到某些抗原刺激时，出现生理功能紊乱或组织细胞损伤等异常的超敏反应的适应性应答。根据超敏反应发生机制和临床特点，将其分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ四型。目前国内外由超敏反应引起的疾病的发病率明显上升。Ⅰ型超敏反应，又称变态反应（allergy）或速发型超敏反应，其特点是:①由IgE介导，肥大细胞和嗜碱性粒细胞释放生物活性介质引起的局部或全身反应;②发生快，消退亦快;③常引起生理功能紊乱，几乎不发生组织细胞严重损伤;④具有明显个体差异和遗传倾向。过敏性疾病属于Ⅰ型超敏反应,其关键环节在于抗原刺激机体产生过量的IgE。已知Th2细胞分泌的IL-4是B细胞唯一的IgE类别转换因子【1，2】，而且它可以从多方面加强Ⅰ型超敏反应;而Th1细胞产生的IFN抑制Th2细胞增殖活化。分泌IL-4可以间接抑制Ⅰ型超敏反应的发生【3】。目前较多学者认为过敏病人体内Th1Th2细胞亚群失衡。Th2细胞含量升高，IL-4分泌增多，在抗原刺激下B细胞产生IgE，引起Ⅰ型超敏反应【4】。如何改善病人体内Th1Th2细胞失衡状态，抑制高滴度IgE产生是当前研究方向之一【5】。我们用黄芪水煎剂制成的冻干粉经胃管给豚鼠用药，观察了其对Ⅰ型超敏反应早期反应，晚期反应及细胞因子的影响。1材料与方法1.1 实验对象??豚鼠21只，体重200~250g，6~8周 1.2 实验分组 随机分为3组：正常组，致敏组和实验用药组。1.3 ?仪器??酶标仪、离心机、二氧化碳孵箱、显微镜等。1.4 ?试剂??83.3%的黄芪水煎剂冷冻干燥后备用；马血清，淋巴细胞分离液；检测IL-4?IFN的试剂盒，日美公司；0.5mol/LpH7.5的EDT；Aanks液；15%的甲醛；0.5mg/mlConA储存液。 1.5 实验方法1.5.1 ELISA方法测IL-4 IFN的浓度1.5.1.1 致敏 致敏组的豚鼠腹腔注射稀释0.2ml马血清；正常组腹腔注射等量的生理盐水。1.5.1.2 给药 致敏1周后，实验用药组豚鼠灌胃0.5mg/只，用黄芪冻干粉稀释液4ml（6.7×10∧-3g/kg体重），其余两组生理盐水灌胃，给药1周。1.5.1.3 淋巴细胞培养 致病2周后（用药1周）豚鼠心脏采抗凝血2ml，淋巴细胞分离液分离淋巴细胞，1640营养液调细胞浓度为6×10∧6个/ml在24孔板中培养淋巴细胞，每孔加6×10∧6个/ml的淋巴细胞1ml同时每孔加conA刺激。将24孔板置于37℃，5%的CO2的孵箱中培养。1.5