生物活性透明质酸对脂多糖诱导的人树突状细胞和巨噬细胞炎症应答作用.pdf

中华实验和临床感染病杂志(电子版)2017年2月第ll@第1期ChinJExpClinInfectDis(ElecVonicEdition)，February2017，Vo1．11，No．1 基 础 论 著 生物活性透明质酸对脂多糖诱导的 人树突状细胞和巨噬细胞炎症 应答作用 尤娜 褚萨萨 朱进 张馨 杨志国。 汪茂荣 ， 【摘要 】 目的 探讨经人透明质酸酶PH20特异处理的重组HA，即生物活性透明质酸 (B．HA) 对脂多糖 (LPS)诱导的人树突状细胞 (DC)和巨噬细胞炎症应答的影响。方法 DC细胞和人急性 单核细胞 白血病单核细胞株 (THP．1)经不同浓度的B—HA预先处理，加入LPS~JI激不同时间，收集 细胞和培养上清，采用实时荧光定量PcR和ELIsA方法检测细胞因子mRNA和蛋白表达水平的变化。 结果 THP一1细胞实验中，与LPS组相 比，B．HA20mgm／l不仅能够显著降低促炎因子肿瘤坏死因子．a (TNF。a)和白细胞介素．8(IL．8)的表达量，同时能够显著增加抗炎因子 白细胞介素一10 (IL一10) 的表达量。其细胞中TNF—a、IL一8和IL一10mRNA表达水平分别为24．414-1．94、35．764-4．195114．994- 0．07，而LPS组分别为38．484-1．47、62．7士1．933112．27-40．16，差异均具有统计学意义 (f=5．781、 P=0．0290，t=5．695，P=0．0300，t=15．20、尸=0．0040)。细胞上清中三者蛋 白表达水平分别为 (1609．004-75．66)pg／ml、 (213．10-49．14)pgm／l~lJ(496-3-441．92)pg,m／l，LPS组分别为 (3O18-4 102．8)pg／ml、 (587．4-43．140)pgm／l$11 (243．3-420．23)pg／ml，差异均具有统计学意义 ( 11．04、 P=0．0080，t=38．74、P=O．0007，t=5．434、P=0．0320)。在人外周血分化的DC细胞实验中，B—HA 对细胞因子TNF—c、【IL，85~111L一10的表达均无显著影响 (P均 0．05)。结论 B—HA能有效调节人 巨噬 细胞炎性因子的表达，抑制其炎症反应；对人Dc细胞的炎症反应无显著影响，提示B．HA对人炎性免 疫细胞的炎症反应作用具有选择性。 【关键词】 生物活性透明质酸；脂多糖；炎症反应；树突状细胞：人急性单核细胞 白血病单核 细胞株 Bioactivehyaluronicacid(B—HA)onIipopolysaccharide-inducedinflammatoryresponseinhuman dendriticcellsandmacrophages YouNaiChuSasai．Zhudin2ZhangYins YangZhiguo3WangM aorongi ． , , , DepartmentofInfectiousDiseases，AnhuiMedicalUniversityAffiliatedBayiClinicalCollege,Hefei230032, China；2DepartmentofMicrobiology,Center0厂DiseasesControlofNanjingMilitaryDistrict,Nanjing210002， China,SInstituteofLiverDiseases．the81stHospitalofPLA．Nanjing210002,China Correspondingauthor．WangMaorong,Email：maorongwang@126．com 【Abstract] ObjectiveToinvestigatetheeffectsofhyaluronidasePH20processedrecombinant humanhyaluronicacidfragments(bioactiveHA，B—HA)onlipopo1ysaccharide(LPS)一inducedinflammatory responseinhumandendriticcel