基础生物学实验(三)_基础生物学实验(安徽大学生物研究生复试,生命科学学院).pptxVIP

基础生物学实验(三)生物化学（ 2005）;目录;实验一 糖类的定量测定 —3，5-二硝基水杨酸比色定糖法 一、实验目的 1．掌握3，5一二硝基水杨酸法定糖的原理及方法。 2．用3，5一二硝基水杨酸比色法测定山芋粉 中总糖。 3．熟悉分光光度计的原理及使用方法。 二、实验原理 糖类的测定方法有物理方法和化学方法两类。 由于化学方法比较准确，常常使用之。还原糖的测定 是糖定量测定的基本方法。还原糖是指含有自由醛基和酮 基的糖类。 ; 3，5一二硝基水杨酸与还原糖共热后被还原成棕红色的氨基化合物，在一定范围内，棕红色物质颜色的深浅程度与还原糖的量成正比。因此，我们可以利用比色法测定样品中还原糖以及总糖的含量。 该法是半微量定糖法，操作简便、快速，杂质干扰较少。 三、实验操作 （一）样品中总糖的水解及提取 准确称取山芋粉1g，放入小三角烧瓶中，加入10ml6N HCL和15ml蒸馏水，混匀。在沸水浴加热30min后，用KI-I2溶液检查水解程度。若已水解完全，则不呈现蓝色。冷却后加入酚酞试剂一滴，以10%NaOH中和至溶液呈微红色。过滤并定容至100ml。再精确吸取上述溶液10ml，放入100ml容量瓶，稀释到刻度，备用。 （二）葡萄糖标准曲线的制作