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不同因素对企鹅珍珠贝插核育珠的影响 企鹅珍珠贝属大型珍珠贝类因其生长快，抗病力强，分泌珍珠质速度快，并且壳比较宽厚，适于粘贴较大的珠核，我国已小规模用来培育附壳珍珠[1-3]。企鹅珍珠贝历来被认为是养殖半圆附壳珠的优良贝。早在1889年，日本人已开始采用企鹅珍珠贝培育附壳珠试验，每贝植入12–24mm直径的半球型核8-10粒，养殖六个月后收获，盈利颇为可观[4]。 我国在企鹅珍珠贝上已经尝试插核，培育游离的圆形珍珠，但插核存在的主要问题是手术贝死亡多、脱核率高[5-8]，为解决这些问题，我们把对插核有影响的因素列人研究范围，采用正交法同时进行对比试验，分析不同因素对企鹅珍珠贝插核育珠的影响以期能找到企鹅珍珠贝插核的最佳条件。 1 材料与方法 1.1 材料 1.1.1插核母贝：插核用贝的个体大小有壳长10mm与15mm两种，供插核手术用的企鹅珍珠贝，贝壳完整无缺，腹缘有新生鳞片，外面黑色角质层无严重剥落现象，无寄生穿孔海绵，生殖腺尚未成熟或已排完精卵的成贝。贝被选好后，还要逐一清理、洗刷干净，切除露在贝壳外面的足丝棒，然后，使铰合部朝下倒立于贝架上，待其自然开口，进而加栓。 1.1.2珠核: 海水贝壳切成条、块后，经研磨、抛光而成，分直径为5.5mm的素核与药核，直径 6.7mm的素核与药核，共四种，药核外用壳聚糖处理。 1.1.3笼具: 术前处理笼、休养笼、锥形笼。 1.1.4吊绳：长200cm。 1.2 方法 1.2.1 实验设计1：不同插核员对企鹅珍珠贝留核率、死亡率的影响 1.2.1.1术前处理 将植核用贝切除足丝，挑选外壳光洁、贝壳完整、合乎规格的贝，清洗干净,及时增加他们的笼养密度，移至低水温海底吊养，抑制母贝的活力，阻止其生殖腺再度发育和成熟。按每笼50只养于天然海区备用。吊养笼为方形, 笼长40cm，宽30cm，高20cm，吊养水深3m左右，笼间距50cm，行间距100cm。 1.2.1.2 栓口 将植核用贝从海区取回,洗涮干净,阴干,待其自然开口后用木塞栓口，企鹅 珍珠贝闭壳肌十分有力，不要用开口钳强行开口，以免损伤贝体及破坏贝壳。 1.2.1.3 制作细胞小片 切取外套膜外侧上皮细胞为小片，小片的大小和形状对形成珍珠质量影响大，通常使用的小片其边缘占珠核的1/3–1/2.5为宜。 1.2.1.4 植核 按照企鹅珍珠贝游离珠的插核方法进行插核。选5个不同插核员，每人插 150个企鹅珍珠贝，实验1天内完成，对每人所插核的贝标记。珠核为直径5.5mm 的素核。 1.2.1.5 休养 植核后的施术贝置于五段笼中,每笼装贝100只,定期检查施术贝,及时清除 死贝。休养期为2个月。30天与60天后，统计5个不同插核员的150个企鹅珍珠贝的留核率与死亡率。 1.2.2 实验设计2：珠核大小、珠核处理（药核、素核）对企鹅珍珠贝留核率、死亡率的影响 对处理好的企鹅珍珠贝，设计四组方案进行对比实验，本试验分别利用5.5mm的素核与药核，6.7mm的素核与药核四种不同珠核进行插核，每组插150个企鹅珍珠贝，施术后的休养方法同上。30天与60天后，统计4组企鹅珍珠贝的留核率与死亡率。 1.2.3实验设计3：珠核大小、插核后悬挂方式对企鹅珍珠贝留核率、死亡率的影响 对处理好的企鹅珍珠贝，设计四组方案进行对比实验，本试验分别利用直径5.5mm的素核、6.7mm的素核对壳长10mm的企鹅珍珠贝进行插核。各插300个企鹅珍珠贝。植核后，插两种不同珠核的企鹅珍珠贝各分出一半出来倒侧置休养，一半正常修养。30天与60天后，统计4组企鹅珍珠贝的留核率与死亡率。 1.2.4实验设计4：珠核大小、插核贝大小对企鹅珍珠贝死亡率、留核率的影响 对处理好的企鹅珍珠贝，设计四组方案进行对比实验，本试验分别利用5.5mm的素核、6.7mm的素核对壳长10mm与15mm大小两种企鹅珍珠贝进行插核。四组每组各插150个企鹅珍珠贝，施术后的休养方法同实验设计1。分别在插核后7天、14天、21天、30天、45天、60天统计企鹅珍珠贝的死亡率，在30天与60天后统计企鹅珍珠贝的留核率。 2 结果 2.1 不同插核员对企鹅珍珠贝留核率、死亡率的影响 表7 不同插核员插核后企鹅珍珠贝的留核率与死亡率 插核员 插核时间 30天留核率(%) 30天死亡率(%) 60天死亡率(%) 1 1月6日 75.3 a 1.33 a 2.67 a 2 1月6日 45.3 c 1.33 a 2.67 a 3 1月6日 60.7 b 0.67 a 1.33 a 4 1月6日 54.6 b 0.67 a 0.67 a 5 1月6日 58.0 b 0.67 a 2.67 a 卡方检验p 0.0000 0.9282 0.5983 同一人插核，30天死亡率与60天死亡率