糖与无机盐对姜黄组培快繁影响.docVIP

糖及无机盐对姜黄组培快繁的影响 　　摘 要：以姜黄根茎为外植体，采用不同糖种类、不同糖浓度和不同无机盐浓度对比，进行不定芽增殖和生根壮苗培养研究，探索其组织快繁技术的适宜因子。结果表明：全量的MS和30g/L蔗糖最适宜姜黄的增殖和生根培养，芽增殖系数高，长势好，试管苗根多而粗壮 关键词：姜黄；组培快繁；增殖；生根 中图分类号：Q949.718.31 文献标识码：A DOI：10.11974/nyyjs.20151132002 引言 姜黄（Curcuma Longa L.）是姜科姜黄属多年生草本植物，在我国广东、广西、海南、云南、福建、四川、贵州及台湾广泛栽培，该植物株高达1.5m，根茎发达，成丛，椭圆形或圆柱状，橙黄色，极香，每株5～7片叶，叶片长椭圆形[1、2]。其花色奇特、艳丽，花姿优美，近年来正成为切花、盆花新品和布置花坛、林边、路旁绿化点缀的首选花卉[3]。姜黄还是一种常用中药，具有破血通经，行气止痛的功效，用于胸胁刺痛，闭经，风湿肩臂疼痛，跌扑肿痛。姜黄所含的姜黄素类成分具有广泛的生理活性，对多种癌细胞有抑制作用，具有良好的开发应用前景。此外，姜黄还是一种天然着色剂，其着色鲜明，使用量小，是联合国粮食与农业组织和世界卫生组织所规定的使用安全性高的天然色素之一，广泛用于食品和饮料着色[4] 目前，姜黄的组织培养报道主要有寇亚平等采用添加6-BA、NAA、TDZ不同浓度和不同组合的MS基本培养基，进行不定芽诱导、丛生芽继代增殖和生根、壮苗培养等研究，研究结果表明诱导率高达86.7%，增殖系数达14.1，生根率达100%[5]；张施君等人在MS培养基中添加2，4-D、TDZ、6-BA、NAA激素以研究姜黄愈伤组织再生体系的建立，结果显示：在2，4-D和6-BA的激素组合中再加入TDZ，愈伤组织能够不断增殖生长，其它组合使诱导率达到80%，出芽数为5.1个，移栽成活率可达90%以上[6]；宋关玲等人采用6-BA+NAA组合进行芽诱导，6-BA+KT组合进行芽增殖，NAA单因子进行生根[7]；韦丽君等人在姜黄生根试验中采用1/2MS、MS添加NAA激素进行不同培养基对不定芽壮苗生根的影响研究，结果表明在不定芽的生根壮苗中，以培养基1/2MS+NAAO.5 mg/Ld的效果最好[8]。在上述的姜黄组织培养报道中，多数是关于不同的激素配比的方式研究，而通过不同的无机盐浓度对再生植株研究报道很少。本研究采用不同无机盐浓度、不同糖种类、糖浓度对姜黄组培快繁的影响研究，该研究的目的是建立姜黄多因子影响效果，为规模化快繁工作奠定基础 1 材料与方法 1.1 试验材料 选择生长旺盛，无病害的当年生姜黄，以根茎作为试验材料 1.2 试验方法 1.2.1 灭菌及初始培养 用自来水冲洗根茎上的泥土，沥干水后，在超净工作台上，先用75%的乙醇浸泡10s，无菌水冲洗1次，再用0.1%升汞浸泡20min，用无菌水冲洗5次。将消毒好的根茎，以1.5cm长为单位接种于MS+6-BA2.0mg/L培养基上进行芽诱导培养 1.2.2 培养条件 本实验的各个培养阶段中，培养物均置于光照强度为1500lux日光灯照明条件下，培养温度为（26±2）℃，每天光照9h 1.2.3 培养基配制方法 培养基均附加卡拉胶9 g/L，pH 5.8，经高温高压（ 121℃，0.14 MPa） 灭菌20 min 1.3 试验设计 1.3.1 不同浓度的无机盐对姜黄增殖的影响 设置不同浓度的无机盐分别为1/4MS、2/4MS、3/4MS 、MS、3/2MS，添加6-BA2.0mg/L，共5种处理，每种处理接种10袋，每袋3个单芽，3次重复，30d统计增殖系数 1.3.2 不同种类的糖对姜黄增殖的影响 以MS作为基础培养基，添加6-BA2.0mg/L，设置30g/L糖种类的分别为乳糖、麦芽糖、食用蔗糖，共3种处理，每种处理接种10袋，每袋3个单芽，3次重复，30d统计增殖系数 1.3.3 不同浓度的蔗糖对姜黄增殖的影响 以MS作为基础培养基，添加6-BA2.0mg/L，设置不同浓度的蔗糖分别为10g/L、20g/L、30g/L、40g/L、50g/L，共5种处理，每种处理接种10袋，每袋3个单芽，3次重复，30d统计增殖系数 1.3.4 不同浓度的无机盐对姜黄生根的影响 取株高3cm的无根苗作为材料，设置不同浓度的无机盐分别为1/4MS、2/4MS、3/4MS、MS，添加NAA0.5mg/L，共4种处理，每种处理接种10袋，每袋3株，3次重复，30d统计生根情况 1.3.5 不同浓度的蔗糖对姜黄生根的影响 取株高3cm的无根苗作为材料，以MS作为基础培养