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第八章 免疫学应用 免疫学检测技术 抗原或抗体检测 免疫细胞及其功能检测 免疫学预防 人工主动免疫 人工被动免疫 免疫治疗 免疫增强剂 免疫抑制剂 第一节 免疫学检测技术 一、抗原或抗体检测 抗原抗体反应的特点： 特异性 可逆性 可见性 抗原抗体反应的影响因素 抗体过剩 比例适当 抗原过剩 抗原抗体的比例与其形成免疫复合物大小的关系 １、凝集反应： 颗粒性抗原＋相应抗体 →凝集块 细菌、细胞等颗粒性Ag或表面包被抗原的颗粒状物质与相应Ab在电解质存在的情况下结合，出现肉眼可见的凝集团现象。 包括：直接凝集反应、间接凝集反应、反向间接凝集反应、协同凝集反应等。如血型鉴定、肥达试验等。 直接凝集反应 1:2稀释待测血清 1:4 1:8 1:16 玻片法 试管法 常用于菌种鉴定或ABO血型鉴定 常用于检测抗体的滴度或效价，见于临床诊断伤寒或副伤寒所用的肥达氏反应和诊断布氏菌病所用的瑞特试验。 间接凝集和间接凝集抑制试验 2、沉淀反应： 单向琼脂扩散试验 毒素、组织浸液及血清中的蛋白等可溶性抗原与相应抗体反应后，出现肉眼可见的沉淀物，称为沉淀反应。沉淀反应可在液体中进行，也可在半固体琼脂凝胶中进行。 3、免疫比浊法 　　抗体（Ab）与可溶性抗原（Ag）反应，形成一定结构的免疫复合物，成为悬浮于反应溶液中的微粒。在沉淀反应中形成的复合物微粒具有特殊的光学性质，可用仪器检测，提高了检测的速度、灵敏度和易操作性。 4、免疫标记技术 　　免疫标记技术是将已知抗体或抗原标记上易显示的物质，通过检测标记物来反应抗原抗体反应的情况，从而间接地测出被检抗原或抗体的存在与否或量的多少。常用的标记物有荧光素、酶、放射性核素及胶体金等。免疫标记技术具有快速、定性或定量甚至定位的特点，是目前应用最广泛的免疫学检测技术。 免疫标记技术：——免疫酶技术 1、包被抗体 洗 2、加抗原 洗 3、加酶标抗体 洗 4、加底物显色 1、包被抗原 洗 2、加抗体 洗 3、加酶标抗 球蛋白 洗 4、加底物显色 ELISA双抗体夹心法 ELISA间接法 免疫标记技术： ——免疫荧光技术 免疫荧光直接法 免疫荧光间接法 免疫标记技术：——放射免疫测定法（RIA） 放射免疫测定法（RIA）是将放射性核素分析的灵敏性和抗原抗体反应的特异性结合的测定技术。具有灵敏、精确、特异性高、易规范化及自动化等优点的一种先进的免疫标记技术。 二、免疫细胞及其功能检测 1、T细胞及其亚群检测： 目前多采用荧光免疫法，通过检测T细胞表面的CD抗原来了解外周血T细胞及其亚群的百分率。 2、淋巴细胞转化试验： T细胞受到特异性抗原或有丝分裂原刺激后发生增殖，可通过以下方法检测： 形态计数法：活化细胞体积增大、形态不规则、胞质增多、细胞核松散及出现较多核仁； 3H-TdR或125I-UdR掺入法：3H-TdR能掺入到合成的DNA中，用液体闪烁仪检测样品的放射活性，特点是灵敏可靠，但须特殊仪器，易有放射性污染。 3、B细胞检测 采用免疫荧光技术直接法，通过检测Smlg来了解B细胞的数量。 4．细胞因子检测 （1）免疫学检测法 （2）生物活性检测法 （3）分子生物学检测法 第二节 免疫学预防 根据特异性免疫应答的原理，采用人工方法将Ag/Ab制成各种制剂，接种于人体，使其产生/获得特异性免疫力，达到预防某些疾病的目的。 分为：人工主动免疫 人工被动免疫 一、人工主动免疫： 是给机体输入疫苗或类毒素等抗原物质，剌激机体产生特异性免疫力。 1、死疫苗：用物理或化学的方法将病原微生物杀死制备而成的制剂。又称灭活疫苗。如乙脑疫苗、百日咳疫苗。 2、活疫苗：用人工变异或从自然界筛选获得的减毒或无毒的活的病原微生物制成的制剂。又称减毒活疫苗。如卡介苗、麻疹疫苗、风疹疫苗、脊髓灰质炎