首株来源于转移灶的人胆囊癌细胞系EH-GB1的建立及鉴定.pdfVIP

.84. 中华肿瘤杂志2010 年2 月第32 释第2 期 Chin J Onc，址. Februa町 2010. VoI .32. No.2 ·基础研究. 首株来源于转移灶的人胆囊癌细胞系 EH-GBl 的建立及鉴定 李林芳胡还拿刘反王欲晗吴生工乎金华君苏长青姜小清刘位顾坚忠 关孟起钱其军 [摘要l 目的 建立转移性胆囊癌细胞系，鉴定并研究其生物学特性。 方法 从人胆囊癌转移 灶取材.将标本分离成单细胞悬液，用含 15%始牛血溃的DMEM 培养液进行原代初传代培养.缩养成 功后命名为 EH-CBI 细胞。 电镜下观察EH-GBI 细胞的形态，绘制细胞生长曲线。 SCID IJ、鼠皮下接 种EH-CBI 细胞，观察 EH-GBI 细胞的成瘤能力。采用免疫氢化法.俭测小鼠移植瘤组织中 CAI9-9 的表达。 分别附携带绿色荧光蛋白(GFP) 和红色荧光蛋白报告基因( Red2)的假病毒感染 EH-GBI 细胞.观察 EH-GBI 细胞表达GFP 和 Red2的情况。 结果 EH-GBI 细胞体外连续传代20 代以上，形 态上具有典型的恶性上皮细胞特征.倍增时间约为24 ho SCID 小鼠皮下接种 EH-GBI 细胞后的成瘤 率为l∞%0 移植瘤细胞中 CA19-9 昼强阳性表达。 EH-GBI 细胞感处携带GFP或Red2基因的~病毒 后，可稳定地表达 GFP 和 Red2。 翁论 EH-GBI 细胞有鲤成为首株来源于转移灶的稳定的人n.E!囊癌细 胞系，转给并持续表达 GFP 和 Red2的 EH-GBI 细胞是胆量量癌临床与基础研究中的理想实验模型。 i 主锺词1 胆囊肿瘤; 转移; 细胞系; 小鼠 Establishment and characterlzati佣 of a human gallbladderωmnoma cell IIne EH-GB 1 orlglnated rrom a metastatic tumor U Un-far啄- • HU HlJiln-z~. UU CMn. WANG Jing-归队 WU Hong-ping. 川HUIJ.-川， SU Ckar啄-qing， J/ANG XÛlO-q吨. UU Jia . GU Jia.n伽ng， WUMeng-ckao. QIAN Q时u凡 ·μoor.酬ry 01 Gene- Viral Therapy. EIU臼m Hepal4biJiaη• Surgery Hospítal , Second Milit.ary Med比d UnirersÎly. Skangkai Zω438 ， China Corrupondir啄剧础。.r: QIAN Qi.户1l. Email: qianqj@sillO-gene.cn [Abstrad) 例如刽ve To 回tablish a hurnan gallbladderωrcinoma cell line derived from a met幽tatic 萨1Ibladder carcinoma and idenlify its biological characteristics. M咄咄 Tissue samples were 回归r81ed from Ihe surgícal s附imen obtained from a patient with metastatic carcinoma and single-cell uspen9ion w田 prepared. Then the cells were cultu陀d in DMEM medium supplemented 机由 15% {eω bovine 铠rum. The moφhology of tumor cells w曲。bserved under an el配胁n microscope . The cell 伊wth curve w.幽 plotted. The tumo咿nicity of tbe cellline w臼制. died by 阳bcutan四us 10时ulalion in SCID mice. The cells 时陀 infecled by lentivi