Cu（Ⅱ）离子诱导的β-淀粉样蛋白聚集抑制剂筛选及分子构效关系分析.pdfVIP

第33卷 第 7期 应 用 化 学 V01．33Iss．7 2016年 7月 CHINESEJOURNALOFAPPUEDCHEMIsTRY July2016 Cu(II)离子诱导的 -淀粉样蛋 白聚集 抑制剂筛选及分子构效关系分析 王承克 王振新¨ (江苏大学食品与生物工程学院 江苏 镇江 212032；中国科学院长春应用化学研究所 长春 130022) 摘 要 阿尔茨海默症药物的开发对该疾病的治疗非常重要。利用纳米金为探针研究了 l3种化合物抑制 Cu“诱导的 一淀粉样蛋白聚集的能力，筛选出了10种有效的抑制剂，并获得了抑制剂抑制能力与其分子结 构间的关系，利用筛选出的抑制剂实现了 淀粉样蛋白聚集过程的抑制和H：0：产生量的减少，对阿尔茨海默 症的研究具有重要意义。 关键词 阿尔茨海默症 ；纳米金；抑制剂 中图分类号 ：0657．3 文献标识码 ：A 文章编号：1000-0518(2016)07-0834-07 DOI：10．11944／j．issn．1000-0518．2016．07．150375 阿尔茨海默症(AlzheimerSdisease，AD)是一种多发于老年人群的神经退行性疾病，患者脑部会逐 渐形成空洞，伴随记忆力严重减退、情绪不稳定、易怒等症状，给患者和其家庭带来不便 ¨ 。目前认为 淀粉样蛋白(卢一amyloid，A )在患者脑部的大量生成，及其在金属离子(如cu 和zn。等)存在时形成 的聚集体是AD的主要原因 J。尤其是cu 可以诱导A 构型变化，形成A卢一cu 复合物，影响神经信 号传导，伴随产生活性氧物质(reactiveoxygenspecies，ROS)，会造成神经细胞机能丧失，最终凋亡 。 因此，寻找能够抑制 Cu 诱导的A 聚集过程对于治疗AD具有重要意义。 金属离子络合剂能够与金属离子形成强的配位作用，减缓或抑制其与 A 的相互作用。近年来， EDTA、氯碘羟喹、喹啉等化合物被尝试用于减少AD患者脑部已经形成的淀粉样蛋白斑块，具有一定成 效 。。尽管一系列方法，如荧光法、圆二色谱法、顺磁共振法等被用于研究Cu¨与A口的相互作用，然 而，由于设备昂贵、操作繁琐，且检测信号往往受样品中共存组分干扰较大，这些方法不适合准确、快速、 高通量地研究A 的聚集过程以及AD药物的开发 ’ j。另一方面，目前尚无A 聚集抑制剂抑制能力 与其构型间相互关系的系统研究。近年来，由于纳米金 (goldnanoparticle，GNP)探针优异的光学性能， 在小分子、蛋白、细胞的分析检测中受到越来越多的关注 彩J。在以前的工作中 ，本课题组对 A芦在金属离子存在时的聚集过程进行了初步研究，证实了存在金属离子使 Ap的聚集明显加速，且聚 集体构型发生改变；同时还对A卢聚集体的细胞毒性进行了研究，发现cu¨诱导的A 聚集体对神经细 胞的毒性增强，并建立了灵敏检测A卢的方法。但是前述工作主要集中于水溶性较好的A 短链多肽的 研究 ，其作为模型分子与实际应用还有一定距离；另一方面，以上工作中只是对少数几种化合物抑制 聚集的能力进行初步研究，没有系统地研究化合物构型与其抑制能力的关系，也没有考察化合物对天然 存在的A 多肽聚集过程的影响，因此在AD药物的研究上存在不足。本文以功能化纳米金为探针，对 一 系列不同构型的化合物抑制 cu¨诱导A 聚集的能力进行研究，初步获得了AD药物的设计原则，同 时对筛选出的化合物抑制长链 A 构型变化和减少ROS产生的能力进行了研究。 1 实验部分 1．1 仪器和试剂 生物素(biotin)修饰的多肽A l-l6(biotin)(序列为GK(biotin)GDAEFRHDSGYEVHHQK)，A芦l_42 2015．10-22收稿，2015—11-25修回，2015—12-l1接受 国家 自然科学基金21305032)、中国博士后科研基金 (2014M551522)、江苏省博士后科研基金(1402073B)资助 通讯联系人：王振新 ，研究员；Tel／Fax：0431E-mai