生物②必修62《基因工程及其应用》课件.ppt

 第六章《从杂交育种到基因工程》 第2节基因工程及其应用 能发光的水母 能否让热带鱼也能发光? 设想 不能发光的热带斑马鱼 基因“嫁接” 基因工程：又叫做基因拼接技术或DNA重组技术。 通俗的说，就是按照人们的意愿，把一种生物的某种基因提取出来，加以修饰改造，然后放到另一种生物的细胞里，定向地改造生物的遗传性状。 一、基因工程原理 原 理： 操作水平： 结 果： 目的基因 供体细胞 受体细胞 基因重组 DNA分子水平 定向地改造生物的遗传性状，获得人类所需要的品种。 获得新性状 基因工程的总体思路: 培育转基因大肠杆菌的简要过程： 你认为上述培育转基因大肠杆菌的关键步骤有哪些？ 普通大肠杆菌 (不能分泌胰岛素) 人体组织细胞 提取 胰岛素基因 与运载体DNA拼接 导入 大肠杆菌(含胰岛素基因) 转基因大肠杆菌 (能分泌胰岛素) 培育转基因大肠杆菌的关键步骤： 1.ONE 胰岛素基因从人体细胞内提取出来 2.TWO 胰岛素基因与运载体DNA连接 3.THREE 胰岛素基因导入受体(大肠杆菌)细胞 基因的“剪刀” 基因的“针线” 基因的运载体 特点： 一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列，并在特定切点切割DNA分子，即专一性。 结果： 产生黏性末端 1.基因的“剪刀”—限制性核酸内切酶(限制酶) 二、基因操作的工具 作用： 切割磷酸二酯键 如:EcoR Ⅰ 1、该限制酶能专一识别GAATTC的序列，并在G和A之间将这段序列切开。 2、 EcoRⅠ限制酶识别了GAATTC的序列后，将会发生什么样的变化？ 基因的“剪刀”—限制性核酸内切酶(限制酶) CTTCATG AATTCCCTAA GAAGTACTTAA GGGATT GGCATCTTAA AATTCCGTAG 练习使用EcoR Ⅰ剪切目的基因 CTTCATG AATTCCCTAA GAAGTACTTAA GGGATT GGCATCTTAA AATTCCGTAG 目的基因 黏性末端 2.基因的“针线”—DNA连接酶 DNA连接酶连接的是什么？ 基因操作的工具 连接两个DNA片段，形成磷酸二酯键 使用DNA连接酶制作重组DNA分子 甲片段 CTTCATG AATTCCCTAA GAAGTACTTAA GGGATT 乙片段 GGCATCTTAA AATTCCGTAG 重组DNA分子 GGCATCTTAA AATTCCGTAG DNA连接酶的作用是： A.子链和母链之间形成氢键B.黏性末端之间形成氢键C.两个DNA末端间的缝隙连接D.A、B、C都对 C （2006.台州质检）下列是由限制酶切割形成的DNA片段，能用相应DNA连接酶将它们恢复连接的组合是 ①…CTGCA …G ②…G …CTTAA ③ G… ACGTC… ④ AATTC… G… A. ①③；②④ B. ①②；③④C. ①④；②③ D.以上都不对 A 目的基因(如人的胰岛素基因)怎样才能导入受体细胞(如大肠杆菌细胞)？ 3.基因的运输工具——运载体 常用的运载体有两类： 1）细菌细胞质的质粒 2）噬菌体或某些动植物病毒 基因操作的工具 大肠杆菌的质粒 ： 运载体应该具有什么特点呢? 基因操作的工具 质粒：存在于许多细菌和酵母菌等生物细胞中,是拟核和细胞核外能够自主复制的很小的双链环状DNA分子。　 载体的作用 作为运载工具，将目的基因转移到宿主细胞中； 利用它在宿主细胞内对目的基因进行大量复制 载体应具备的条件 能在宿主细胞内稳定保存并大量复制； 有多个限制酶切割位点，便于与外源基因连接； 具有标记基因，便于筛选。 二、基因工程的基本工具 三、基因工程的“四步曲” 提取目的基因 1 目的基因与运载体结合 2 将目的基因导入受体细胞 3 目的基因的检测和表达 4 1 2 基因工程的操作工具 1.基因的剪刀 ——限制性内切酶 2.基因的针线 ——ＤＮＡ连接酶 3.基因的运输工具 ——运载体 基因工程的操作步骤 1.目的基因的提取 2.目