(河北)2017届河北省辛集市第三中学高考生物一轮复习梳理学案：38《微生物的培养与应用》（新人教版）.docVIP

[教材知识问题化梳理] 一、微生物的实验室培养 1．培养基 (1)概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养物质。 (2)成分 (3)分类 2．无菌技术 3．纯化大肠杆菌 (1)制备固体培养基的流程： (2)纯化方法 二、土壤中分解尿素细菌的分离和计数 (1)菌种筛选：使用尿素是唯一氮源的选择培养基培养。 (2)统计菌落数目：常用方法有稀释涂布平板法、显微镜直接计数法。 (3)细菌分离与计数的实验流程：土壤取样→配制培养基→微生物的培养与观察→细菌的计数。 三、分解纤维素的微生物的分离 1．纤维素酶 (1)组成：一种复合酶，它至少包括三种组分，即C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶。 (2)作用：纤维素纤维二糖葡萄糖。 2．筛选方法 (1)方法：刚果红染色法，即通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。 (2)培养基：以纤维素为唯一碳源的选择培养基。 3．实验流程 透明圈的菌落：产生纤维素酶的菌落周围出现透明圈 [效果自评组合式设计] 一、在小题集训中洞悉命题视角 (1)根据物理状态的不同，培养基只有液体培养基和固体培养基两种类型。(×) (2)培养基中一般都含有水、碳源、氮源和无机盐四种成分。(√) (3)在配制培养基时，除满足营养需求外，还应考虑pH、O2及特殊营养物质的需求。(√) (4)只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素。(√) (5)筛选分解尿素的细菌应以尿素作为培养基中的唯一氮源。(√) (6)统计样品中的活菌一般用平板划线法。(×) (7)在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂，若指示剂变蓝，则说明筛选到分解尿素的细菌。(×) (8)刚果红能与培养基中的纤维素形成红色复合物。(√) (9)纤维素酶只包括三种组分：C1酶、Cx酶和葡萄糖苷酶。(×) (10)筛选分解纤维素的微生物的培养基中是以纤维素为唯一碳源的选择培养基。(√) 二、在回顾教材图表中强化学科能力 下表为筛选分解尿素细菌的培养基，据此回答问题： KH2PO4 Na2HPO4 MgSO4·7H2O 葡萄糖 尿素 琼脂 1.4 g 2．1 g 0．2 g 10．0 g 1．0 g 15．0 g 将上述物质溶解后，用自来水定容到1 000 mL (1)在该培养基中尿素的作用是什么？琼脂的作用是什么？ 答案：尿素作唯一氮源，起选择作用；琼脂作为凝固剂，用于制备固体培养基。 (2)对筛选出的细菌要进行进一步的鉴定，如何鉴定？ 答案：在培养基中再加入酚红指示剂，培养细菌后，pH升高，指示剂将变红。 培养基及微生物的纯化培养技术 1．培养基的种类 (1)按物理状态分类： 培养基种类 特点 用途 液体培养基 不加凝固剂 工业生产 固体培养基 加凝固剂 (如琼脂) 微生物分离、鉴定， 活菌计数，菌种保藏 (2)按功能分类：种类 制备方法 原理 用途 举例 选择培 养基 培养基中加入某些化学物质 依据某些微生物对某些物质的抗性而设计 从众多微生物中分离所需的微生物 加入青霉素分离得到酵母菌和霉菌 鉴别培 养基 培养基中加入某种指示剂或化学药品 产生特定的颜色或其他变化 鉴别不同种类的微生物 用伊红—美蓝培养基鉴别大肠杆菌 2.微生物的纯化培养 方法 平板划线法 稀释涂布平板法 注意事项 (1)接种环的灼烧：①第一次划线前：接种环上的微生物，避免污染培养物 ②每次划线前：杀死残留菌种，保证每次划线菌种来自上次划线末端 ③划线结束后：杀死残留菌种，避免污染环境和感染操作者 (2)灼烧接种环之后，要冷却后再进行操作，以免温度太高杀死菌种 (3)划线时最后一区域不要与第一区域相连(4)划线用力要大小适当，防止用力过大将培养基划破(1)稀释操作时：每支试管及其中的9 mL水、移液管等均需灭菌；操作时，试管口和移液管应在离火焰1～2 cm处(2)涂布平板时：①涂布器用体积分数为70%酒精消毒，取出时，让多余酒精在烧杯中滴尽，然后将沾有少量酒精的涂布器在酒精灯火焰上引燃 ②不要将过热的涂布器放在盛放酒精的烧杯中，以免引燃其中的酒精 ③酒精灯与培养皿距离要合适，移液管管头不要接触任何物体[例1]　用平板划线法或稀释涂布平板法纯化大肠杆菌时(　　) ①可以用相同的培养基　②都需要使用接种针进行接种 ③都需要在火焰旁进行接种　④都可以用来计数活菌 A．①②　　　　　　　　B．③④ C．①③ D．②④ [解析]　平板划线法或稀释涂布平板法都使用固体培养基，故①正确；平板划线法采用接种针进行操作，而稀释涂布平板法采用涂布器进行操作，故②错误；纯化时，要进行无菌操作，需要在火焰旁接种，避免空气中的微生物混入培养基，故③正确；平板划线法一般用于分离而不是计数，故④错误。 [答案]　C 微生物的筛选与计数 1.筛选菌株 (1)原则：