滇桂艾纳香水溶性多糖BRP-B的分离纯化及止血活性.pdfVIP

第28卷 第 1期 应 用 化 学 Vo1．28Iss．1 2011年 1月 CHINESEJOURNAL OFAPPUED CHEMISTRY Jan．2011 滇桂艾纳香水溶性多糖 BRPB的分离纯化及止血活性 廖敏富 “林翠梧 黄 丽。 许子竞 覃飒飒 李爱媛 (广“西大学化学化工学院 南宁530004；广西中医学院 南宁) 摘 要 用蒸馏水溶解滇桂艾纳香浸膏 ，从 中提取多糖，通过膜分离 、三氯 乙酸法脱蛋 白、二 乙氨基 乙基 (DEAE)纤维素脱色、SephadexG10、SephadexG50凝胶柱色谱纯化，获得滇桂艾纳香水溶性多糖 (BRP—B)。由 凝胶渗透色谱 (HPGPC)确定BRP—B为相对分子质量分布均一的多糖，其数均分子量和质均分子量分别为 2654和 2716Da。以血浆复钙时间(PRT)为指标，研究 BRP—B的凝血活性 ，结果显示 BRP—B质量浓度为 6．25×10I2g／L时，凝血时问为248．52s，凝血时间抑制率达22．42％。小白鼠离体子宫实验结果显示，BRP．B 质量浓度为 1．67×10～、1．97×10 及 2．85×10 g／L时能明显增加子宫平滑肌的收缩频率。 关键词 滇桂艾纳香，多糖，分离，纯化 ，止血活性 中罔分类号：0629．1 文献标识码 ：A 文章编号：1000-0518(2011)01-0083-05 DOI：10．3724／SP．J．1095．2011．00124 滇桂艾纳香为菊科艾纳香属植物 (Blumeariparia(BI．)DC．)，具有养肝活血、收敛止血、活血不伤 血、止血不留瘀等功效，可用于各种出血症 ；民间常以水煎汤剂服用，用于治疗妇女功能性子宫出血、产 后出血等症有独特的疗效…。国内对该植物化学成分及药学的初步研究发现该植物含有原儿茶酸、绿 原酸、豆甾醇、J8一谷甾醇、槲皮素 -3]、咖啡酸、小麦黄素、芹菜素、木犀草素等成分l4J。但有关滇桂艾纳 香具体化学成分尤其是多糖的止血作用药理活性研究报道 尚未见。考虑到民间常服用的滇桂艾纳香水 煎汤剂其有效成分均是水溶性的，又鉴于小分子量的多糖具有表观黏度低 、水溶性好 、生物活性多样 、易 于透过机体组织屏障直达细胞 内部发挥药效及利于结构与功能机制的研究等特点 。]，本文报道 了滇 桂艾纳香中相对分子质量在 10 ～10范围内的水溶性多糖成分的分离、纯化、鉴定及其止血活性的初步 研 究。 1 实验部分 1．1 试剂和仪器 滇桂艾纳香水提浓缩浸膏 (广西桂西制药厂)；冷冻血浆，由南宁市中心血站提供健康人血浆， ～ 25℃保存；云南 白药、缩宫素、乐氏液及小 白鼠离体子宫标本等由广西中医学院提供；二乙氨基乙基 (DEAE)纤维素 (上海试剂二厂)，SephadexG10、SephadexG50凝胶柱 (法玛西亚公司)，透析袋 (上海绿 鸟科技公司)，pH=7．1的 PBS缓冲液 (NaC1：0．13mmol／L，KC1：2．7mmol／L，Na，HPO ：12mmol／L， KHPO ：1．5mmol／L，棕色瓶保存)；其它试剂均为国产分析纯。多功能陶瓷膜(合肥世杰膜工程有限责 任公司)，多功能有机膜(合肥世杰膜工程有限责任公司)。GPC仪检测器为Agilent1100型示差折光检 测器，色谱柱为 TSKGELG3000SW TOSOH 串联 TSKGELG4000PW TOSOH，预柱 ：TSKGELSW TOSOHAAS；EasypureLF超纯水仪，BL-420生物信息处理系统，HW-400S型张力传感器 。 1．2 滇桂艾纳香水溶性多糖 (BRP—B)的分离纯化 参照文献 [8]方法，将5kg滇桂艾纳香水提浓缩浸膏，加 l5倍量的蒸馏水溶解过滤，将滤液依次过 截留相对分子质量为 10的陶瓷膜和截留相对分子质量分别为 10和 10。的有机复合膜进行初步分离， 2010-03433收稿 ，2010-04-21修回 国家 自然科学基金 20962002)资助项 目，2007年国家大学生创新实验项 目(071059314) 通讯联系人：林翠梧 ，教授 ；Tel：0771—3275878；E—mail：lincuiwu@16