薄层色谱与高效液相色谱用于矮地茶多糖单糖组成探析.doc

薄层色谱和高效液相色谱用于矮地茶多糖的单糖组成分析 　　[摘要] 目的 分析矮地茶多糖中的单糖组成及摩尔比值。 方法 采用硫酸水解多糖，1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮柱前衍生化高效液相色谱法和薄层色谱法同时分析矮地茶多糖的单糖组成和摩尔比，Agilent TC-C18色谱柱，流动相：乙腈-pH为7.0的磷酸缓冲液（20∶80，0.1%），检测波长：250 nm，流速：1 mL/min；柱温：25℃。 结果 薄层色谱法和高效液相色谱法结果皆表明矮地茶多糖由葡萄糖（Glu）和半乳糖（Gal）组成，高效液相色谱法显示矮地茶多糖中Glu和Gal的摩尔比值约为1∶2.36。 结论 薄层色谱法可用于矮地茶多糖的单糖组成的快速鉴别，方法快速、准确；高效液相色谱法可用于矮地茶多糖中单糖组成的鉴别和摩尔比值测量，方法简单、灵敏、分离效率高 [关键词] 矮地茶；多糖；高效液相色谱；薄层色谱；单糖组成 [中图分类号] R927 [文献标识码] A [文章编号] 1673-7210（2016）10（c）-0130-04 [Abstract] Objective To analyze the monosaccharide composition and the molar ratio of Ardisia japonica Polysaccharide （AJP）. Methods Sulfuric acid was used to hydrolyze AJP. Pre-column 1-Phenyl-3-methyl-5-pyrazalone （PMP） derivation HPLC and TLC method were developed to determine the monosaccharide compositions and the molar ratio of AJP. The mobile phase was acetonitrile-pH 7.0 phosphate buffer （20∶80， 0.1%） with Agilent TC-C18 column. The detection wavelength was 250 nm， the flow rate was 1 mL/min， and the column temperature was 25 ℃. Results The results of TLC and HPLC analysis showed that AJP were consisted of glucose （Glu） and galactose （Gal）. Meanwhile， HPLC analysis showed that the molar ratio of AJP was 1∶2.36. Conclusion TLC which is fast and accurate， can be used for the rapid identification the monosaccharide composition in AJP. HPLC which is simple， sensitive and high separation efficiency， can be used for the quantitative analysis of the monosaccharide composition in AJP. [Key words] Ardisia Japonica； Polysaccharide； HPLC； TLC； Monosaccharide Composition 矮地茶是紫金牛科植物Ardisia japonica（Thumb.） Blume的干燥全草，收录于《中国药典》2015年版[1]，具有止咳平喘、清利湿热、活血化瘀的功效。现代研究证明，矮地茶水提取物具有良好的止咳、抗病毒、抗乙肝等生物活性[2-4]，其中主要化学成分除了内酯类（岩白菜素）、黄酮（槲皮素）等成分外[5-8]，还含有大量的多糖成分，多糖可能是矮地茶潜在的药效成分之一。同时，越来越多的中外学者认为植物多糖是天然药物中的主要药效成分[9-10]。目前，关于矮地茶多糖的研究报道非常少，对多糖的单糖组成进行研究是多糖结构和生物活性深化研究的前提，基于此，笔者采用水提取、多次醇沉得到矮地茶多糖（AJP），用硫酸对AJP进行水解，参照相关文献[11-20]，采用薄层色谱法（TLC）和高效液相色谱法（HPLC）两种方法对矮地茶多糖中单糖组成和摩尔比进行分析，为矮地茶多糖的深入研究提供基础 1 仪器与材料 1.1 仪器 电子分析天平（Mettler Toledo XS