小分子抗原人工合成进展.pdfVIP

第28卷 第4期 应 用 化 学 Vo1．28No．4 2011年4月 CHINESEJ0URNALOFAPPLIED CHEMISTRY Apr．2011 小分子抗原人工合成进展 王建华 张 冲 (重庆大学生物工程学院 重庆 400044) 摘 要 小分子免疫分析技术的应用日渐广泛，合成稳定的、具有 良好免疫原性的人工抗原是制备单克隆抗 体和建立免疫分析方法的前提和关键。本文对国内外半抗原的设计与合成方法、载体的选择、半抗原与载体 的耦联方法等进行了综述，并对小分子抗原人工合成中相关的问题进行了讨论。 关键词 人工抗原，半抗原 ，合成，免疫分析 中图分类号 ：O621．3 文献标识码：A 文章编号 ：1000-0518(2011)04-0367-09 DOI：10．3724／SP．J．1095．2011．00364 近年来，食品中农药、兽药的检测方法已成为研究热点，其中，以小分子为待测物的免疫分析技术发 展迅速。免疫分析是以抗原与抗体的特异性结合反应为基础的新型分析技术。相对于传统检测方法， 它具有简便、快速、灵敏度高和成本低廉、便于现场检测和高度特异性等特点。此外，免疫分析技术对药 品鉴定、药物代谢研究、药材中农药和重金属残留的检验、解毒及环境监测等也具有重要意义LJ4。。免疫 分析几乎适用于所有生物活性物质的检测，其基本原理是以待测物合成人工抗原，经动物获取相应的单 克隆抗体，然后建立和优化免疫分析程序进行检测。有效的人工抗原的合成是保证免疫分析的前提和 关键，其合成途径可归纳为：先根据待测分子的结构设计合成具有活性基团的半抗原，然后依据免疫学 原理选择适当的载体，最后用适当的方式将半抗原与载体相互耦联，形成载体一半抗原结合物，纯化后即 得到人工抗原。近年来，国内外有关人工抗原合成过程中所涉及的半抗原的设计与合成方法、载体的选 择、半抗原与载体的耦联方法等研究有了很大进展，本文对现代免疫分析中小分子人工抗原的合成关键 技术和方法进行了总结和讨论。 1 半抗原的设计与合成 1．1 半抗原的设计 半抗原是指具有反应原性，但不具备免疫原性，能与对应抗体结合出现抗原一抗体反应又不能单独 激发人或动物产生抗体。 半抗原的设计与选择取决于待测物的分子结构，如果待测物本身具有一cOOH、一NH 、一OH和 一 sH等活性基团，可直接通过交联剂与载体偶联，无需对药物结构进行改变即可以作为半抗原使用。若 待测物本身没有可直接与载体共价连接的活性基团，或者虽然具有活性基团但这些基团对维系待测物 的免疫特性十分重要而不能用作与载体偶联时，则必须根据免疫学理论并结合该待测物的自身结构进 行半抗原的重新设计 J。应注意的是 ：首先半抗原的设计中应尽量保留待测物的特征基团，以保证获得 的抗体能够与待测物发生特异性免疫反应，必要的时候还需要对这些基团进行保护；其次半抗原的结构 还应具有一定的复杂性，如含有苯环、杂环和支链等高免疫活性的基 团 ]，近年来也有研究显示在待测 物上连接二肽基团可增强半抗原的免疫活性 。 2010-06-24收稿，2010-09一10修回 国家科技支撑计划 (2007BAD51B05) 通讯联系人：王建华，教授；Tel：023Fax：023E-mail：wjh@cqu．edu．ca；研究方向：药物合成及制剂工程 368 应 用 化 学 第28卷 1．1．1 待测物 自身的衍生化 如果待测物 自身没有可直接与载体共价连接的基团，可首先考虑利用现 有的非特殊构效关系基团，通过水解、氧化、还原和取代等反应产生相应的可连接基团作为半抗原。获 得的可连接基团应力求简单，往往以羧基、氨基为主，便于与载体偶联。含有酯基的的待测物，如肟菌 酯 j，可在碱性条件下水解得到含有羧基的半抗原；有机磷类农药，如对硫磷、甲基对硫磷、杀螟硫磷以 及拟除虫菊酯等其结构中均有一NO，可通过锌、亚铁等还原剂在盐酸作用下还原成一NH：。。“；3一巯基 丙酸可以取代待测物 中氯原子而构