动物实验的基本技术操作4.ppt

医学动物实验的 基本技术方法 动物实验的操作技术方法已成为医学科研和教学工作不可缺少的手段。动物实验方法多种多样，在不同的研究领域有其不同的目的和应用，但是一些基本的操作技术方法是一样的，对于实验研究者来说无论从事哪一类研究的项目，都会不同程度地应用这些技术，动物实验操作的正确与否，会直接影响实验结果，这是科学实验工作者必须熟练掌握的基本功。 基本的操作技术方法The basic of operating techniques ： 动物的抓取、固定、标号、脱毛、麻醉、给药、采集血及尿样、处死、尸检等 一、实验动物的抓取和固定 (snatching and fixing ) 1、小鼠(mouse)的抓取与固定 实验时从笼盒将小鼠尾部抓住并提起，放在笼盖(或表面粗糙的物体)上，轻轻向后拉鼠尾，在小鼠向前挣脱时，用左手(熟练者也可用同一只手)拇指和食指抓住两耳和颈部皮肤，无名指、小指和手掌心夹住背部皮肤和尾部，并调整好动物在手中的姿势。 2、大鼠(rat)的抓取与固定 大鼠抓取方法基本同小鼠，抓大鼠时若操作者不熟练，或者大鼠特别凶猛，操作者最好戴上防护手套(帆布或硬皮质均可)。如若是灌胃、腹腔注射、肌肉和皮下注射时，可采用与小鼠相同的手法，即拇、食指捏住鼠的耳朵及头颈皮肤，余下三指紧捏住背部皮肤，置于掌心中，调整大鼠在手中的姿势后即可操作。 大鼠的尾静脉采血和手术操作就需固定大鼠。麻醉后置于大鼠实验板上(仰卧位)，先用线固定好四肢，然后用棉线将大鼠两上门齿固定于实验板上。如做大鼠尾静脉注射，可将大鼠置于固定器内，使鼠尾留在外面进行操作。 3、豚鼠(Guine pig )的抓取与固定 豚鼠性情温和，胆小易惊，一般不易伤人，抓取时，先用手掌扣住豚鼠背部，抓住其肩胛上方，拇、食指环握颈部，另一只手托住臀部。 如果在实验时豚鼠频繁挣扎，不宜采用此方法，因为操作者的拇、食指会随动物的挣扎越抓越紧而引起豚鼠窒息。 另外，有时可用纱布将豚鼠头部轻轻盖住，操作人员轻扶住其背部或者让其头部钻到实验人员的臂下，然后进行实验操作。 4、家兔(rabbit)的抓取与固定 抓取家兔时，轻轻打开兔笼门，勿使兔受惊，然后将手伸入笼内，从兔头前部把两耳轻轻压于手掌内，兔便卧伏不动，此时将颈背部的被毛和皮肤一起抓住提起，再以另一手托住臀部，使兔身的重量大部分落在该手掌上。 家兔的固定方法可根据需要而采用：①盒式固定，常用作兔耳血管注射、采血或观察兔耳血管变化，兔脑内接种等操作固定；②台式固定，常用作兔静脉采血或测量血压、呼吸等实验和技术操作时的固定；③架式固定，常用于作热原试验时固定。 5、犬(dog)的抓取与固定 经过驯服的犬抓取是很方便的，而未经驯服的犬抓取时，要用特制的钳式长柄犬夹夹住颈部，使犬头向上，颈部拉直，再套上犬链。急性实验用犬，可用犬夹夹住犬颈部后,将它压倒在地，由助手将其四肢固定好。 实验需要麻醉时，把麻醉完善后的犬固定在手术台或实验台上，固定的姿势，依手术或实验的种类而定。一般采用仰卧位或俯卧位，前者便于进行颈、胸、腹、股等部位的实验，后者便于进行背、脑、脊髓实验。用犬头固定器固定犬头。 抓取猪时，一人从背后紧抓猪的两耳将其提起，使其臀部着地，两腿膝部合拢将其躯干夹住。 实验中如需分离猪股静脉取血、注射或输液时，或要在猪腹部或颈部操作时，可将猪仰放在“v字型槽内进行固定，也可用木制三角固定架和帆布吊兜来固定小型猪。 二、实验动物的编号、标记和  去毛方法(number 、 marking and depilation ) （一）编号和标记方法 在动物实验中，为了使实验动物个体间或组间区别开来，便于对每个实验动物的反应情况进行观察，必须对实验动物进行编号、标记。标记的方法很多，但基本原则是： 号码清楚、耐久、简便、易认和适用。 1.临时性标记(temporary markers) 1）染色法(Staining) 染色法是用化学剂在动物身体明显部位如被毛、四肢等处进行涂染，或用不同颜色等来区别各组动物，是实验室最常用、最容易掌握的方法。 常用的标记溶液有：①3％-5％苦味酸溶液（黄色）；②0.5％中性红或品红溶液（红色）；③2％硝酸银溶液，(咖啡色，涂后需光照10min)；④煤焦油酒精溶液（黑色）；⑤龙胆紫溶液（紫色）。 标记时，用标记笔蘸取上述溶液，在动物体表不同部位涂上斑点，