第5章 蛋白子翻译-3.pptVIP

第五章 蛋白质翻译 ● 遗传密码——三联子 ● tRNA的结构、功能与种类 ● 核糖体的结构与功能 ● 蛋白质合成的过程 ● 蛋白质的运转机制 四、蛋白质合成的过程 氨基酸的活化 翻译的起始 肽链的延伸 肽链的终止 蛋白质前体的加工 (一)氨基酸的活化 氨基酰-tRNA合成酶对底物氨基酸和tRNA都有高度特异性。 氨基酰-tRNA合成酶具有校正活性(proofreading activity) 。 氨基酰-tRNA的表示方法： Ala-tRNAAla Ser-tRNASer Met-tRNAMet tRNA与酶结合的模型 (二)翻译的起始 原核生物（细菌）为例： 所需成分： 30S小亚基、 50S大亚基、模板mRNA、 fMet-tRNAfMet、GTP、Mg2+ 翻译起始因子：IF-1、IF-2、IF-3、 2、30S小亚基通过SD序列与mRNA模板相结合。 真核生物翻译起始的特点 ●核糖体较大,为８０Ｓ； ●起始因子比较多； ● mRNA 5′端具有m7Gppp帽子结构 ● Met-tRNAMet ● mRNA的5′端帽子结构和3′端polyA都参与形成翻译起始复合物； 真核生物翻译起始复合物形成(区别原核生物) 原核生物中30S小亚基首先与mRNA模板相结合，再与fMet-tRNAfMet结合，最后与50S大亚基结合。而在真核生物中，40S小亚基首先与Met-tRNAMet相结合，再与模板mRNA结合，最后与60S大亚基结合生成80S·mRNA·Met-tRNAMet起始复合物。 (三)肽链的延伸 肽链延伸由许多循环组成，每加一个氨基酸就是一个循环，每个循环包括：AA-tRNA与核糖体结合、 肽键的生成 和 移位。 延伸因子(elongation factor, EF) ： 原核生物：EF-T (EF-Tu, EF-Ts) EF-G 真核生物：EF-1 、EF-2 1、AA-tRNA与核糖体A位点的结合 2、肽键形成是由转肽酶/肽基转移酶催化 3、移位 核糖体向mRNA3’端方向移动一个密码子。 需要消耗GTP，并需EF-G延伸因子 延长因子EF-G有转位酶( translocase )活性，可结合并水解1分子GTP，促进核蛋白体向mRNA的3侧移动 。 (五)蛋白质前体的加工 1、N端fMet或Met的切除 新生蛋白质经蛋白酶切后变成有功能的成熟蛋白质 2、二硫键的形成 两个半胱氨酸-SH -SH -SH 二硫键 3、特定氨基酸的修饰 磷酸化、糖基化、甲基化、乙基化、羟基化和羧基化 ● 遗传密码——三联子 ● tRNA的结构、功能与种类 ● 核糖体的结构与功能 ● 蛋白质合成的过程 ● 蛋白质的运转机制 氧化 4、切除新生肽链中非功能片段 前胰岛素原蛋白翻译后成熟过程示意图 Contents * Contents 氨基酸 + tRNA 氨基酰- tRNA ATP AMP＋PPi 氨基酰-tRNA合成酶 原核生物中，起始氨基酸是： 起始AA-tRNA是： 真核生物中，起始氨基酸是： 起始AA-tRNA是： 甲酰甲硫氨酸 fMet-tRNAfMet 甲硫氨酸 Met-tRNAMet 第一步反应 氨基酸 ＋ATP-E —→ 氨基酰-AMP-E ＋ AMP ＋ PPi 第二步反应 氨基酰-AMP-E ＋ tRNA ↓ 氨基酰-tRNA ＋ AMP ＋ E tRNA 氨基酰-tRNA合成酶 ATP IF-3 IF-1 翻译起始(翻译起始复合物形成)又可被分成3步： （P122） 1. 核蛋白体大小亚基分离 A U G 5 3 IF-3 IF-1 S-D序列 IF-3 IF-1 IF-2 GTP 3.在IF-2和GTP的帮助下， fMet-tRNAfMet进入小亚基的P位，tRNA上的反密码子与mRNA上的起始密码子配对。 A U G 5 3 IF-3 IF-1 IF-2 GTP GDP Pi 4、带有tRNA、mRNA和3个翻译起始因子的小亚基复合物与50S大亚基结合，GTP水解，释放翻译起始因子。 A U G 5 3 IF-3 IF-1 A U G 5 3 IF-2 GTP IF-2 -GTP GDP Pi met 40S 60S Met Met 40S 60S mRNA eIF-2B、eIF-3、 eIF-6 ① elF-3 ② GDP+Pi 各种elF释放 elF-5 ④ ATP ADP+Pi elF4E, elF4G, elF4A, elF4B,PAB ③ Met Met-tRNAMet-elF-2 -GTP 真核生