酶联免疫吸附结合免疫亲和柱－高效液相色谱法检测大米中黄曲霉毒素B1的研究.pdfVIP

包装与食品机械 ２０１６年第３４卷第６期 酶联免疫吸附结合免疫亲和柱 －高效液相色谱法 检测大米中黄曲霉毒素 Ｂ１ 的研究 陈旭明，李 婷 （广东省潮州市质量计量监督检测所，广东潮州５２１０１１） 摘要：对大米中两种检测黄曲霉毒素Ｂ１ 方法的结合使用进行了研究，即采用酶联免疫吸附法对大 米中黄曲霉毒素Ｂ１ 进行初筛，对可疑样品采用免疫亲和柱－高效液相色谱法进行验证。样品经甲醇水 提取、免疫亲和柱净化、高效液相色谱分离、碘柱后衍生、荧光检测器测定。结果表明，黄曲霉毒素Ｂ１ 线 性关系良好，相关系数为０．９９９９，检出限为０．５０ ｇ／ｋｇ，回收率为８９．４％～９５．２％，ＲＳＤ值为 １．８８％ μ ～３．０５％。两种方法的结合应用，适用于较大批量样品的检测。 关键词：酶联免疫吸附法；碘柱后衍生；免疫亲和柱－高效液相色谱法；黄曲霉毒素Ｂ１ ；大米 中图分类号：ＴＳ２０７．７ 文献标志码：Ａ 文章编号：１００５－１２９５（２０１６）０６－００６８－０３ ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００５－１２９５．２０１６．０６．０１７ ＳｔｕｄｙｏｎＤｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆＡｆｌａｔｏｘｉｎＢ１ ｉｎＲｉｃｅｂｙＥＬＩＳＡａｎｄＩＡＣＨＰＬＣ ＣＨＥＮＸｕｍｉｎｇ，ＬＩＴｉｎｇ （ＣｈａｏｚｈｏｕＱｕａｎｔｉｔｙａｎｄＭｅａｓｕｒｅｍｅｎｔＳｕｐｅｒｖｉｓｉｏｎａｎｄＩｎｓｐｅｃｔｉｏｎＩｎｓｔｉｔｕｔｅ，Ｃｈａｏｚｈｏｕ５２１０１１，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ：ＴｈｅｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎｏｆｔｗｏｄｅｔｅｃｔｉｏｎｍｅｔｈｏｄｓｏｆａｆｌａｔｏｘｉｎＢ ｉｎｒｉｃｅｗａｓｓｔｕｄｉｅｄ．ＡｆｌａｔｏｘｉｎＢ ｉｎ １ １ ｒｉｃｅｗｅｒｅｓｃｒｅｅｎｅｄｂｙＥＬＩＳＡ，ｔｈｅｓｕｓｐｉｃｉｏｕｓｓａｍｐｌｅｓｗｅｒｅｖｅｒｉｆｉｅｄｂｙＩＡＣＨＰＬＣ．Ｓａｍｐｌｅｓｗｅｒｅｅｘｔｒａｃｔｅｄｗｉｔｈ ｍｅｔｈａｎｏｌｗａｔｅｒｓｏｌｕｔｉｏｎａｎｄｃｌｅａｎｅｄｕｐｂｙｉｍｍｕｎｅａｆｆｉｎｉｔｙｃｏｌｕｍｎｓ，ｓｅｐａｒａｔｅｄｂｙＨＰＬＣ，ａｎｄｔｈｅｄｅｔｅｒｍｉｎａ ｔｉｏｎｗａｓｃａｒｒｉｅｄｏｕｔｂｙＦＬＤａｆｔｅｒｉｏｄｉｎｅｄｅｒｉｖａｔｉｚａｔｉｏｎ．Ｔｈｅｍｅｔｈｏｄｈａｄｇｏｏｄｌｉｎｅａｒｉｔｙａｎｄｔｈｅｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎｃｏｅｆ ｆｉｃｉｅｎｔｓｗａｓ０．９９９９，ｔｈｅｌｉｍｉｔｏｆｄｅｔｅｃｔｉｏｎｗａｓ０．５０ ｇ／ｋｇ．Ｔｈｅａｖｅｒａｇｅｒｅｃｏｖｅｒｉｅｓｗａｓｉｎｔｈｅｒａｎｇｅｏｆ８９．４％ μ ～９５．２％ｗｉｔｈｒｅｌａｔｉｖｅｓｔａｎｄａｒｄｄｅｖｉａｔｉｏｎｓ（ＲＳＤ）ｏｆ１．８８％～３．０５％．Ｔｈｅｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎｏｆｔｈｅｔｗｏｍｅｔｈｏｄｓ ｉｓｓｕｉｔａｂｌｅｆｏｒｔｈｅｄｅｔｅｃｔｉｏｎｏｆｌａｒｇｅｑｕａｎｔｉｔｉｅｓｏｆｓａｍｐｌｅｓ． Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ＥＬＩＳＡ；ｉｏｄｉｎｅｄｅｒｉｖａｔｉｚａｔｉｏｎ；ＩＡＣＨＰＬＣ；ａｆｌａｔｏｘｉｎＢ１ ；ｒｉｃｅ ０ 引言 准。我国ＧＢ２７６１ ２０１１《食品安全国家标准食品 中真菌毒素限量》中规定，大米中ＡＦＴＢ１ 的含量 黄曲霉毒素 Ｂ （ＡＦＴＢ ）是黄曲霉菌的代谢 不得超过１０ ｇ／ｋｇ［４］，欧盟条例（ＥＵ）Ｎｏ１６５／２０１０ １ １ μ 产物，广泛存在于霉变的玉米、花生、稻米等粮食 规定