拟南芥两种实用培养技术介绍.pdfVIP

科技信息 高校理科研究 拟南芥两和实用培荠技市介绍 扬州大学生物科学与技术学院 季芳芳 [摘要]本文介绍了“模式植物”拟南芥无菌苗培养和温室土壤培养两种简便、有效的培养技术，以期为拟南芥研究者 和爱好者提供一点经验。 [关键词]拟南芥培养技术无菌苗 “模式植物”拟南芥(Arabidop8isthaliana)被誉为植物中体积相同，播种密度大体一致。 的“果蝇”，广泛用于植物分子生物学、遗传学和发育生物学研 二、拟南芥土壤培养方法 究。由于拟南芥是第一个完成全部基因组序列测定的高等植物， 播种前准备工作：取适量种子散布于铺有预湿滤纸的培养 其功能基因组学研究对其它高等植物包括农作物如水稻等的研 皿内，4℃，春化2天。土壤按普通菜园土4份，泥炭土4份，蛭 究具有重大影响，因此拟南芥研究越来越受到国际植物学界及 石3份比例混匀，装盆后，放置蓄水的大培养盆中。 各国政府的重视。相对国外而言，我国对拟南芥的研究起步晚， 播种与管理：镊子小心撕取滤纸将种子轻轻播种到预先吸 投入少，规模小，为了尽快在国际植物功能基因知识产权竞争中 足水分的土壤表面，每盆播种15粒左右，保鲜膜封口。种子萌 拥有一席之地，为我国的农业生产和社会经济服务，我国对拟南 发，2～3对真叶形成后去掉保鲜膜，喷水保湿，花盆仍放置于蓄 芥的研究日益重视，国内许多植物学和农学等相关的实验室中， 水的大培养盆中。三周后，莲座形成，将花盆从蓄水的大培养盆 它已越来越多的被运用。 中移出，间苗或移苗，每盆保留2～3株壮苗．注意适时浇水、保 实验过程中培养好拟南芥是一个关键环节。然而，拟南芥种 湿、除草、除虫，一般管理即可。荚果发黄干枯时，收获种子，自然 子小，幼苗弱，培养困难，完全按照国外参考文献上的方法栽培， 干燥后，放入小离心管于低温储藏。营养生长期多采取10小时 并不能成功，必须结合具体的实验条件调整，反复实践、总结。扬 左右短日照，生殖生长期16小时左右长日照，多结种子。温度一 州大学生物科学与技术学院植物生长发育与蛋白组学研究室从 般26℃，湿度75％以上．国内诸多关于拟南芥土壤培养法的报 美国引进多种拟南芥野生型及突变体，鉴定、繁种并保存获得成 道，认为由于拟南芥种子极细小，均匀播种困难，而多采取先 功，本文根据长期实践介绍了一套适合淮海地区土壤和气候特 Ms培养基培养无菌苗，5～6对真叶后移苗到土壤中继续培养 点的拟南芥培养方法及一些体会，以供同行和拟南芥研究爱好 的方法，认为更省时、省力，经济有效，但我们实验比较发现，直 者参考。 接播种土壤更好，生长期短，成苗容易，植株健壮，管理粗放，野 一、拟南芥无菌苗培养方法 播种前准备工作：1．5ml小离心管、1“枪头、无菌去离子 播种方法，方便容易，播种均匀，节省种子。 水(ddH20)、废液杯等高温蒸汽(121℃，15分钟)灭菌，烘箱高拟南芥土壤培养生长周期，形态特征等因光照、温度等外界 and 温烘干。MS基本培养基配置：1倍的Ms盐(Mura8hige因子影响而差异明显。春季和秋季适宜拟南芥播种，淮海地区2 8alt basal 月下旬至3月下旬，9月中下旬至lo月下旬可多批播种，自然 sk∞g mixtllre)，加1．o％琼脂，1．o％(g／v)蔗糖(添加 条件下生长，光照，温度等因子不需要人工调节，省力且栽培效 与否，根据具体实验要求而定)，pH5．8，灭菌后，浇平板待用(采 用一次性无菌塑料培养皿，若玻璃培养皿需事先高温灭菌处 果好。其他时间只要人工措施控制好温度、光照等条件亦可无数 理)。配置70％(v／v)酒精，2％(v／v)次氯酸钠待用。 次播种至收获，如对6月下旬后的高