免疫组化技术.ppt

组织化学技术 江苏大学 基础医学与医学技术学院 卢小东;组织化学的基本概念： 组织化学：组织水平，对组织内存在的各种物质进行定性、定量以及其局部的和移动的部位分析的方法 免疫组织化学：基于抗原抗体反应 酶组织化学;疾病的病理学研究概括起来主要在基因和蛋白水平上进行的研究。 免疫组织化学方法主要用于基因蛋白质水平表达的研究。 蛋白表达= 分布，定位，定量； 蛋白表达与与肿瘤生物学行为及预后关系等 ;材料： 抗体： 多克隆抗体：为针对多个抗原决定簇的抗 体，为产生抗体的动物血清或免疫球蛋白。 单克隆抗体：为一个B淋巴细胞分化增殖产 生的抗体，可识别有限的抗原决定簇，特异 性强。 ;显示物： 酶标反应： ①碱性磷酸酶（Alkatine phasphotase,AP） AP与不同的底物（萘酚As-Mx、快蓝、快红）作用，可形成不同颜色的终产物。用新品红（New fuchsine）显色，可形成不溶于有机溶剂的红色沉淀，不褪色。 ②辣根过氧化酶(Horseradise peroaidase,) HRP：底物为DAB－四盐酸二氨基联苯胺，产生棕色沉淀，不溶于有机溶剂，不褪色。 ;;胶体金： 指金的水溶胶（以微小粒子分散在水溶液中， 免疫电镜观察 ;主要方法： 直接法： 间接法：经过了第二抗体放大效应 ;;A