2转座酶的原核表达和其DNA结合活性.PDFVIP

文章编号：１６７４５５６６（２０１７）０３０３３９０９ ＤＯＩ：１０．１２０２４／ｊｓｏｕ．２０１６１００１８８１ 金鱼Ｔｇｆ２转座酶的原核表达及其ＤＮＡ结合活性 １ １ １ ２ １，２ 司蕊蕊 ，赵　茜 ，卢梦琪 ，邹曙明 ，蒋霞云 （１．上海海洋大学 食品学院，上海　２０１３０６；２．上海海洋大学 农业部种质资源与利用重点开放实验室，上海　２０１３０６） 摘　要：金鱼Ｔｇｆ２转座子基因属于Ｈｏｂｏ／Ａｃｔｉｖａｔｏｒ／Ｔａｍ３（ｈＡＴ）超家族，其编码的活性转座酶能在多种鱼类转 座中介导基因插入及诱变，因此在鱼类重要性状主控基因的筛选、功能解释及育种等方面具有重要的应用前 景。鉴于Ｔｇｆ２转座酶基因（ＪＮ８８６５９１）存在众多稀有密码子，本研究依据大肠杆菌对密码子的偏好性，对金鱼 Ｔｇｆ２转座酶基因进行密码子优化，所得Ｔｇｆ２转座酶基因连接原核表达载体ｐＥＴ２８ａ（＋），将重组载体转化到 大肠杆菌ＢＬ２１（ＤＥ３）细胞。该大肠杆菌细胞在培养温度３７℃、ＯＤ ０．５时用ＩＰＴＧ诱导获得高效表达，即 ≈