第十章植物细胞培养的基本过程和方法精品.pptVIP

第十章植物细胞培养的基本过程和方法 第一节 植物细胞的获取 1、外植体的选择：适当生长期的健康植株、细胞之间粘连程度小； 叶片组织 2、外植体的前处理： （1）冲刷材料; 流水 几分钟-数小时 吐温 (2) 表面浸润灭菌；超净台 70%酒精 10-30S （3）深层灭菌； 氯化汞 次氯酸钠 （4）无菌水冲洗。 3min/次 3-10次 二、通过愈伤组织诱导获取植物细胞 愈伤组织的概念--P173 形成过程： 1、起始期； （诱导期） 准备进行分裂 2、分裂期；细胞体积变小→分生状态 3、形成期。大小稳定 内部深层细胞开始分裂 怎样从愈伤组织分离得到细胞？ P175 获得愈伤组织后，挑选质量好的愈伤组织块，用无菌的镊子或小刀分割得到植物小细胞团，也可以将愈伤组织转移到液体培养基中，加入经过灭菌处理的玻璃珠，进行振荡培养，使愈伤组织分散成为小细胞团或单细胞，然后用适当孔径的不锈钢筛网过滤，除去大细胞团和残渣，得到一定体积的小细胞团或单细胞悬浮液。 果胶酶 增强分散效果 细胞生长指标 1、细胞生长计量: 细胞计数 细胞密实体积 细胞鲜重 细胞干重 2、细胞活力测定 ①体积选择法：通过细胞体积大小分级，直接将处于相同周期的细胞进行分选，然后将同一状态的细胞继代培养于同一