高效液相色谱测定糖化血红蛋白方法的建立和评价.pdfVIP

第 21卷第 2期 江 苏 大 学 学 报(医学 版) Vo1．21 No．2 2011年 3月 JournalofJiangsuUniversity(MedicineEdition) Mar．2011 高效液相色谱测定糖化血红蛋 白方法 的建立与评价 涂国华，姜旭淦，李礼，吴亮，逯兆喜，陈盛霞 (江苏大学基础医学与医学技术学院，江苏 镇江 212013) [摘 要] 目的：建立高效液相色谱(HPLC)测定糖化血红蛋 白(GHb)方法 ，并对其进行评价 。方法 ：以Bio—Rex70 阳离子交换树脂为填料，在 HPLC仪上采用梯度洗脱分离测定 GHb，对其分析性能进行评价。对5o例健康人和50例 糖尿病患者标本中糖化血红蛋白A1c(HbA1e)的含量进行测定。结果 ：Hb、HbA0和HbA1e的吸收光谱一致，吸收峰 均为415nm。该法能使HbA1c与HbA1(a+b)、HbAO清楚分离 ，HbAIc峰面积或峰高与标本中HbA1c含量成正比。 对临床标本测定的变异系数为0．54％～1．15％；平均回收率为 97．7％，质控品的实测值在标示值范围内；在 0～15． 8％范围内线性 良好 ；未见脂血、黄疸对测定的干扰；标本稳定性与保存条件和标本特性有关。健康人和糖尿病患者 HbA1c检测结果分别为3．3％ ～6．1％和6．8％～14．4％。结论：Bio—Rex70一HPLC法测定糖化血红蛋白具有精密度 好、准确度高、线性范围宽等优点，可用于GHb或 HbA1c常规方法的评价和临床标本的分析。 [关键词] 糖化血红蛋 白；高效液相色谱；离子交换树脂 [中图分类号] R446．1 [文献标志码] A [文章编号] 1671—7783(2011)02～0147—04 Establishmentand evaluation ofhigh pressureliquid chromatography methodforglycosylatedhemoglobinmeasurement TU Guo—hua，JIANGXu—gan，L1Li， Liang，LUZhao—xi，CHEN Sheng—xia (SchoolofMedicalScienceandLaboratoryMedicine，JiangsuUniversity，ZhenjiangJiangsu212013，China) [Abstract] 0bjective：Toestablishandevaluateahighpressureliquidchromatography(HPLC)method fordetermingglyeosylatedhemoglobin(GHb)．Methods：TakingtheBio—Rex70cationexchangeresinas filler，GHbwasseparatedanddeterminedwithHPLC analyzerbygradientelution．Theanalysisperform- anceswereevaluated．Meanwhile，theHbA1ccontentsof50healthyand50diabeticpatientssampleswere determined．Results：TheabsorptionspectrumsofHb，HbA0andHbA1ewereconsistent，theabsorption peakswere415nm．UsingtheHPLCmethodHbA1ccouldbeclearlyseparatedfrom HbA1(a+b)and HbA0 andHbA1cpeakareaorpeakheightwasproportionaltotheHbA1econtentinsamples．TheCV of clinicalspecimendeterminationwas0．54％ ～1．15％ ．Theaveragerecoverywas97．7％ ．Theactualmeas—