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2.3 分解纤维素的微生物的分离(预)
【学习目标】
1.纤维素酶的种类及作用
2. 从土壤中分离出分解纤维素的微生物
【知识梳理】
一、基础知识
1.纤维素
含________三种元素,是一种多糖。纤维素的基本组成单位是________,人体内没有________,所以人体不能直接以纤维素为能源物质,但土壤中有分解纤维素的微生物,最终把纤维素分解成________释放到无机环境。
C、H、O 葡萄糖 纤维素酶 葡萄糖
2.纤维素酶
纤维素酶是一种 酶,一般认为它至少包括三种组分,即 、 和 ,前两种酶使纤维素分解成 ,第三种酶将纤维二糖分解成 。
复合 C1酶 CX酶 葡萄糖苷酶 纤维二糖
3.纤维素分解菌的筛选
方法: 染色法,通过颜色反应筛选。刚果红可以与纤维素形成 ,当纤维素被纤维素酶分解后,红色复合物无法形成,出现以纤维素分解菌为中心的 ,我们可以通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。
刚果红 红色复合物 透明圈
二、实验设计
实验流程
土壤取样:富含的环境
↓
选择培养:用培养,以增加纤维素分解菌的浓度
↓
梯度稀释:制备系列稀释液
↓
涂布平板:将样品涂布到鉴别的培养基上纤维素分解菌
↓
挑选产生的菌落
【课前热身】
1.鉴定分解纤维素的微生物要用刚果红染色,加入刚果红的操作可在( )制备培养基时梯度稀释时倒平板时涂布时培养基上长出菌落时A. B. C. D.加入刚果红的操作有两种:先培养微生物再加入刚果红进行颜色反应,正确;在倒平板时就加入刚果红,正确以下关于分离纤维素分解菌的实验操作错误的是( )A.经选择培养后将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上B.选择培养这一步可省略,但得到的纤维素分解菌会较少C.可通过定时测定葡萄糖产量的变化来衡量纤维素分解菌培养液中的纤维素酶产量D.对照组可用等量的纤维素分解菌培养液涂布到不含纤维素的培养基上【答案】
3.在筛选纤维素分解菌的过程中,通常用刚果红染色法,这种方法能够通过颜色反应直接对纤维素分解菌进行筛选。某同学在实验时得到了如图所示的结果,则纤维素分解菌位于( )
A.①② B.③
C.②③ D.①②③
【答案】【解析】在筛选纤维素分解菌的过程中,通常用刚果红染色法。刚果红与纤维素形成的红色复合物,在纤维素被分解后将不再存在,因此在培养基上会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈,据此可判断图示中的纤维素分解菌位于③下面从土壤中筛选纤维素分解菌的实验步骤,正确的是( )①土壤取样②称取10g土壤加入盛有90 mL无菌水的锥形瓶中③吸取0.1 mL进行平板涂布④依次稀释至101、102、103、104、105、106、107稀释度A.①→②→③→④B.①→③→②→④C.①→②→④→③D.①→④→②→③【答案】
2
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