第4章消毒灭菌.ppt

Higher Education Press Higher Education Press 第4章 消毒灭菌与病原微生物实验室生物安全 Disinfection、Sterilization and biosecurity of laboratory 灭菌(sterilization) ： The process of destroying all microbial forms. A sterile object is free of all microbial forms, including bacterial spores. 用理化方法杀灭物体上所有微生物的方法。(包括杀灭病原微生物和非病原微生物、细菌的繁殖体和芽胞)要求比消毒高。 概念： 消毒(disinfection) ： The reduction or elimination of pathogenic microorganisms in or on materials, so they are no longer a health hazard. 用理化方法杀死物体上病原微生物的方法,称为消毒。 (不一定能杀死含芽胞的细菌和非病原微生物). 用于消毒的化学药物称为消毒剂(disinfectant)。 消毒剂在常用浓度下只对繁殖体有效，对芽胞需提高浓度和作 用时间。 防腐(antisepsis) ： Use of chemical agents on skin or other living tissue to inhibit or eliminate microbes; no sporicidal action is implied. 利用理化因素抑制体外细菌生长繁殖的方法，细菌一般不死亡。 同一种化学药物在高浓度时为消毒剂，低浓度时为防腐剂。 抑菌（bacteriostasis）： 抑制体内或体外细菌繁殖。抗生素等为常用的抑菌剂。 无菌(asepsis) ：No living microorganisms exists. 无菌操作(antiseptic technique)：防止细菌进入人体或其他物品的操作技术。 清洁(cleaning)：通过除去尘埃和一切污秽以减少微生物数量的过程。 第二节 消毒灭菌的方法 一、物理消毒灭菌法 （一）热力灭菌法 （二）辐射杀菌法 （三）滤过除菌法 （四）干燥与低温抑菌法 二、化学消毒灭菌法 (一)热力灭菌法 High Temperature 原理：高温杀灭细菌 无芽胞细菌经55℃-60℃作用30-60分钟死亡;湿热80℃经5-6分钟可杀灭所有细菌繁殖体、真菌和酵母菌。 干热灭菌法 Dry heat 湿热灭菌法 Moist heat 1.干热灭菌法dry heat sterilization A.原理:脱水干燥和大分子变性。 B.方法: ⑴焚烧：废弃物、尸体; ⑵烧灼:接种环和试管口的灭菌; ⑶干烤:烤箱灭菌; 171℃,1h; 160℃,2h; 121℃,16h 适用于高温下不变质、不损坏、不蒸发的物品,例玻璃器皿、瓷器、玻璃注射器等的灭菌。 (4)微波：高频电磁波，热效应和综合效应，用于食品和药品的消毒。 (5)红外线：0.7-1000μm电磁波，1-10 μm热效应强；照射表面灭菌，不能使物体均匀加热，医疗器械灭菌. 2.湿热灭菌法moist heat sterilization A．巴氏消毒法(pasteurization)：法国巴斯德创用 ⑴61.1-62.8℃，30分钟； ⑵71.7℃15-30秒 主要用于牛乳消毒。 B.煮沸法: 100 ℃ 5min(繁殖体)~2h(芽胞) 2%碳酸氢钠 食具、刀剪、镊子 C.流动蒸气灭菌法:又称常压蒸气灭菌法,水蒸汽100 ℃ 15~30min(繁殖体) D.间歇蒸气灭菌法:Arnold(阿诺氏灭菌器) 此法用于不耐高热的含糖、牛奶等培养基的消毒。 E.高压蒸气灭菌法（autoclaving）:最有效的一种灭菌方法 1.05kg/cm2(15磅) 、121.3℃，15-20分钟。用于一般培养基、生理盐水、手术敷料等耐高温耐湿等物品的灭菌。 高压蒸汽灭菌器 湿热灭菌与干热灭菌的比较 同一温度下，湿热灭菌比干热灭菌效果好 原因 1、湿热中细菌菌体蛋白较易凝固 2、湿热的穿透力比干热大 3、湿热的蒸汽有潜热 物理消毒灭菌法 （二）辐射杀菌法 紫外线 波长240~300m的紫外线具有杀菌作用 杀菌机理： 干扰DNA的复制与转录 紫外线穿透力较弱 不耐热物品的表面消毒 特 点：