兔出血症病毒NJ85株衣壳蛋白变异性分析及立体结构预测.pdfVIP

‘426’Proceedi—ng—s o—f—9th—S—ym—po—si—um—o—f 保护性免疫应答。当VP60非融合表达或在N端加上少数的氨基酸残基时“……，其抗原性无显著变化，能诱 导机体产生有效的保护性免疫应答，本实验因此采用了这一策略。 原核表达系统具有表达量大、周期短、易纯化、成本低等优点，已在基因工程制药中得到了广泛的应用。 纵观国内外现有对VP60基因的研究，从免疫效果、生产成本以及产业化要求考虑，本研究选用原核表达载 体pET28，该载体中的启动子TTlac可高效表达插入的外源目的基因。为便于表达产物的纯化，在表达的外 VP60在原核表达系统中的表达量，国内外现有的报道在21％以内5’…，而在本研究中的表达量达40％，并且 工程疫苗奠定了重要的物质基础。 值得一提的是，为了便于目的基因的克隆表达，在设计扩增引物时，通常在其5’端添加限制性酶切位 点。本研究发现，酶切位点及其与起始密码子的距离对表达量有较大影响，分析原因可能与SD序列有关，对 此正在进行更多的重复验证和深入的分析。 参考文献 [1]刘胜江，薛华平，浦伯清，等兔的一种新病毒病一一兔病毒性出血症．畜牧与兽医，1984，16(6)：253～254 Z2]唐福坤中国兔业现状及发展前景中国养兔杂志，2002，(1)：3～7 isolatesofrabbit diseasevirus．Vet 55 MI。．HouseC offour [23 Serologiccomparison hemorrhagic Berninger andcharacterizationofacalicivlrusasthecausativeofalethal diseaseinrabbits M．Purification J F，Prieto [4]Parra agent hemorrhagic Virol1990·64(8)4013～4015 al Molecular and inEscherichiacoilofthe from JA，CasaisR。MatinMS，et expression capsidproteingene [5]B09a cloning，sequencing GenVirol disease isolateAST／89)J 1994，75(9)：2409～2413 rabbit virus(Spanish hemorrhagic etal ofrabbit diseasevirusstructural Alonso GarciaLIt MS，MartinJM，Perez lmmunogenicproperties hemorrhagic [6]Marln Ordoyo vaccineVirus VP60 arecombinantbaculovirus：anefficient Res．1995，39(2”：119～128 expressed protein by