远端缺血预处理对血清miRNA表达水平影响及对心肌保护作用探究.docVIP

远端缺血预处理对血清miRNA表达水平影响及对心肌保护作用探究 　　[摘要] 目的 观察远端缺血预处理对血清miRNA的表达水平的影响及对心肌的保护作用。 方法 选择2012年7月～2013年12月本院收治的合并心力衰竭的瓣膜病患者60例，随机分为对照组和观察组，各30例。两组患者入院后行相关评估，麻醉诱导后，观察组患者行远端缺血预处理，对照组同样放置压力带，但不进行充气，后建立体外循环并行手术。检测患者手术前、手术24 h后患者血清肌钙蛋白I（cTnI）、脑钠素（BNP）、肌酸激酶同工酶（CK-MB）的变化；采用实时定量荧光PCR（qRT-PCR）来测定miRNA的表达；观察两组患者术后呼吸机使用时间、ICU停留时间，并采用超声心动图监测手术后7 d左心室射血分数（LVEF）；记录两组患者术后心律失常评分及自动复跳率。 结果 手术24 h后，两组患者生化指标较手术前均有所升高，但观察组升高程度不及对照组，差异有统计学意义（P100 IU/L，或ALT（GPT）100 IU/L]，不能耐受试验；孕妇或处于哺乳期；即往有严重的过敏反应病史；具有其他不适合临床试验的情况。将60例患者分为对照组和观察组，每组30例。两组患者年龄、性别、病程、瓣膜病变类型等一般资料比较，差异无统计学意义（P0.05），具有可比性。见表1 1.2 方法 1.2.1 麻醉方式 采用维库溴铵、咪达唑仑诱导，行气管插管，中心静脉及桡动脉分别置管，连续监测患者生命指征及动脉血压，同时监测体温。手术时给予异丙酚，速度维持在（4～6）μg/（kgh），间断给予芬太尼，速度维持在（8～10）μg/（kgh），同时吸入七氟醚 1.2.2 远端缺血预处理方法[7] 麻醉诱导后，将患者左侧上臂进行远端缺血预处理，用特用压力袖带包绕左上臂，每次5 min，共重复3次，压力200 mmHg。检测指尖氧饱和度下降到80%以下为阳性。5 min间期进行再灌注。对照组同样放置压力带，但不进行充气，共30 min。患者及手术医生进行双盲操作 1.2.3 体外循环的建立及手术[8] 采用正中胸骨切口，于升主动脉远端插入灌注管，上下腔静脉分别插腔静脉引流管，单纯主动脉瓣置换插房腔管，右上肺静脉置管行左心引流，建立体外循环。两组患者均在常规浅低温、中度稀释体外循环下行心内直视瓣膜置换手术，采用冷晶心肌保护液顺灌保护心肌。体外循环：采用常规预充复方氯化钠500 mL，羟乙基淀粉或?拍酷明胶1000 mL，甘露醇200 mL，肝素30 mg，硫酸镁1 g。可采用速尿维持晶胶比范围在0.6～0.7，必要时使用浓缩红细胞或血浆维持术中红细胞比容为0.20～0.25。术中抗凝使用肝素。心脏停跳期间维持体温31℃。灌注流量维持（2.2～2.6）L/（minm2）体表面积。阻断升主动脉后，采用1∶4冷晶-血液20 mL/kg，以250 mL/min的速度从主动脉根部灌注，每隔半个小时用1∶8冷晶-血液10 mL/kg复灌。全部手术均由相同的手术医师完成。 　　1.3评价指标[9，10] （1）采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测患者手术前、手术24 h后的血清肌钙蛋白I（cTnI）、脑钠素（BNP）、肌酸激酶同工酶 （CK-MB）的变化。（2）前期研究已采用miRNA芯片检测RIPC后患者血清miRNA表达谱改变，获得变化倍数大于2倍可能参与远端缺血预处理的miRNA（miRNA-1、miRNA-21、miRNA133a），采用实时定量荧光PCR（qRT-PCR）来测定上述miRNA的表达，检测过程按照上海康成公司提供试剂盒说明来进行。（3）采用超声心动图仪器监测两组患者手术中心脏复跳后左心室射血分数（LVEF）。（4）记录两组患者术后心律失常评分及自动复跳例数，参照 Curtis-Walker标准[4]评价术后患者心律失常评分，标准如下：未出现心律失常计0分；房性心律失常，偶发室早计1分；室早二联律、三联律、频发室早、二度房室传导阻滞计2分；短阵室速，多源室早计3分；室速，三度房室传导阻滞计4分；室颤计5分。自动复跳率=自动复跳例数/总人数×100% 1.4 统计学方法 采用SPSS 17.0版统计学软件包进行数据处理。计量资料以均数±标准差（x±s）表示，比较进行t检验。计数资料以百分比表示，比较进行χ2检验。P0.05），手术24 h后，两组患者上述指标较手术前均有所升高，但观察组升高程度不及对照组，差异有统计学意义（P0.05），手术24 h后，两组患者上述指标较手术前均有所升高，观察组miRNA-1升高程度不及对照组，miRNA-21、miRNA133a升高程度大于对照组，差异有统计学意义（P 　　[3] 胡宪文，蒋玲玲，刘晓芬，等. 线粒体KATP通道