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卵黄抗体IgY在猪生产中的应用 摘要：卵黄抗体(Yolk Immunoglobulin，IgYAnders(1993)推算认为一只蛋鸡每周的抗体产量相当于9～10只小白兔的抗体产量；②鸡蛋的生产成本较低，收集和提纯方便，大规模提取抗体的技术已经成熟；③产生有效免疫反应所需抗原量小；④IgY的化学性质稳定，具有一定的耐热、耐酸、耐碱及耐高渗性能，对胃蛋白酶具有良好的抵抗能力；⑤由于种系发生距离相差很大，禽类IgY与哺乳动物免疫球蛋白之间不会发生交叉血清学反应；⑥不激活哺乳动物的补体系统，不与类风湿因子或Fc受体相结合，避免在免疫检测过程中产生假阴性或假阳性结果；⑦对肠道正常菌群无副作用，也不存在抗药性和药物残留问题。IgY本身是一种优质的蛋白源，有促生长作用。 1．卵黄抗体(IgY) 1.1 IgY抗体结构 IgY大分子的结构与哺乳动物免疫球蛋白类似。Warr等(1995)[1]通过分子结构分析认为IgY是哺乳动物体内IgG 和IgM 的进化前体。IgY 中Cυ3和Cυ4区与哺乳动物IgG 的Cγ2和Cγ3具有同源性；Cυ2是IgY的枢纽区，而它在IgY 中没有得到充分进化。IgY中这种不发达的枢纽区造成了Fab部分的低活性，而这进而可能是IgG 与IgY某些差异的原因。与IgG一样，IgY的Fc片断是绝大部分生物受动器功能的作用部位。IgY-Fc部分包括2条碳氢链，而IgG 只有一条。IgG在重链上含有3个功能域而IgY的重链含有4个功能域，而且IgY缺少铰链区。 1.2 IgY进入卵黄的机制 禽类的免疫系统包括细胞免疫和体液免疫，分别受胸腺和法氏囊的控制。当机体受到外来抗原刺激后，法氏囊内的B细胞分化成为浆细胞，分泌特异性抗体进入血液循环，当血液流经卵巢时，特异性抗体(主要是Ig)在卵细胞中逐渐蓄积IgY通过受体调节作用 ，它只允许母源血液中存在的IgY选择性地向卵黄转移，转运量与其在血清中的浓度相关，该转运对不同IgY 的次级成分没有差异性。当卵细胞分泌进入输卵管时，流经输卵管的血液中含有的特异性抗体(主要是IgA和IgM)进入卵清中，形成卵清抗体。Losch(1986)证实只有少量的IgA 和IgM 经输卵管从血细胞转运到鸡蛋白部分。 2 卵黄抗体在猪生产中的应用 2.1 卵黄抗体在防治仔猪腹泻上的应用 2.1.1 仔猪大肠杆菌性腹泻机制 仔猪大肠杆菌腹泻是产肠毒素大肠杆菌(Enterotoxigenic Escherichia coli，ETEC)是引起新生和断奶仔猪腹泻的主要致病菌之一。大肠肝菌致病因子包括：粘附素(adhension)、肠毒素(Enterotoxins)、水肿病毒素(edema disease principle,EDP)、内毒素(endotoxin)、溶血素(haemolysin)以及最近发现的EatA[2]。其中ETEC引起仔猪腹泻的主要致病原是具有宿主特异性的粘附素和肠毒素。ETEC粘附素实质上是一种菌毛蛋白又称为定居因子(CFAS)。Conway(1990，1991)认为与小肠黏膜上的受体结合是ETEC致病过程中的重要环节。仔猪的肠道黏膜上皮细胞表面具有多种能与ETEC特异性粘附素结合的受体。ETEC宿主特异性菌毛粘附素有20多种，引起仔猪腹泻的主要是K88(F4)、K99(F5)、987P(F5)、F41等。ETEC菌毛抗原能够识别特定受体并与之结合使菌体能够抵抗肠道蠕动产生的冲刷作用从而定植下来，大量增殖并产生肠毒素（耐热肠毒素、不耐热肠毒素、志贺毒素2e、肠管凝集耐热肠毒素）。 耐热肠毒素(ST)与神经节苷脂(GM1)结合激活肠粘膜细胞表面的鸟苷环化酶(GC)，使胞内cGMP含量增多从而导致腹泻；不耐热肠毒素(LT)与GM1结合后激活肠上皮细胞的腺苷酸环化酶，使细胞中cAMP水平升高，进而导致肠粘膜细胞对水和Na+ 、Cl-、HCO3-等过度分泌至肠腔引起腹泻[3]。 2.1.2 IgY抑制大肠杆菌菌毛粘附素与小肠黏膜受体结合的作用机制 可包括一下几个方面：①特定病原菌卵黄抗体能直接黏附于病原菌的细胞壁上，改变病原细胞的完整性，直接抑制病原菌的生长；卵黄抗体可黏附于细菌的菌毛上，使之不能黏附于肠道黏膜上皮细胞；一部分卵黄抗体在肠道消化酶作用下，降解为可结合片段，这些片段含有抗体的可变小肽(Fab)部分，这些小肽很容易被肠道吸收，进入血液后能与特定的病原菌黏附因子结合，使病原菌不能黏附易感细胞而失去致病性，而IgY的稳定区(Fe部分)留在肠内。Jin (199)[4]用抗菌毛卵黄抗体处理后的大肠杆菌在体外与小肠上皮细胞的进行吸附试验，结果表明大肠杆菌在小肠黏液的吸附受到明显的抑制。但试验表明随着E. coli浓度的提高，抑制效果明显降低，说明lgY作用的发挥具有量依赖性。 Yokoya