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- 2017-06-09 发布于河北
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2017-2018年高中生物 第1部分 微生物的利用阶段整合提升 浙科版选修1
阶段整合提升
网 络 构 建
一、微生物培养基的配方
1.基本成分
虽然各种培养基的具体配方不同,但一般都含有水、碳源(提供碳元素的物质)、氮源、无机盐,原因是:微生物的化学组成与其他生物大体相同,也是主要由C、H、O、N、P、S等元素组成,这些元素最终来自外界环境中的各种无机化合物和有机化合物,归纳为碳源、氮源、无机盐、水四大类营养。
2.培养基配方中四种营养成分比较
营养物质 定义 作用 主要来源碳源 凡能提供所需碳元素的物质 合成微生物的细胞物质和一些代谢产物,有些是异养微生物的主要能源物质 无机化合物:CO2、NaHCO3;有机化合物:糖类、脂肪酸、花生粉饼、石油等氮源 凡能提供所需氮元素的物质 合成蛋白质、核酸以及含氮的代谢产物 无机化合物:N2、NH3、铵盐、硝酸盐;有机化合物:尿素、牛肉膏、蛋白胨等水 在生物体内含量很高,在低等生物体内含量更高 不仅是优良的溶剂而且可维持生物大分子结构的稳定 ——无机盐 为微生物提供除碳、氮以外的各种重要元素,包括大量元素 细胞内的组成成分,生理调节物质,某些化能自养菌的能源,酶的激活剂 —— 注:自养型微生物的碳源是无机碳,异养型微生物的碳源是有机碳。由此可见,培养不同类型的微生物,培养基的组成不同,但一般都含有水、碳源、氮源和无机盐四种基本物质。
二、实验注意事项
在大肠杆菌的培养和分离的实验中,要特别强调无菌操作,这是进行微生物实验中必备的操作要求,也是本模块多数实验的基本要求,应该形成无菌操作的行为习惯。无菌操作,既包括各种器皿必须是无菌的,也包括各种培养基也必须是无菌的,同时还要求在接种时,不能带有其他杂菌,所以在实验过程中,应时刻保持这种无菌意识。辨认菌落和菌种种类时,要能大致区分细菌、放线菌与酵母菌菌落,有些用肉眼不能判断的菌落也可借助显微镜进行观察判断。
三、平板划线(划线分离)法和稀释涂布平板(涂布分离)法比较
比较 平板划线法 稀释涂布平板法特点 操作简单,但是单菌落不易分离 操作复杂,但是单菌落易分离原理 连续划线。由于划线后,线条末端细菌的数目比线条起始处要少,每次从上一次划线的末端开始,能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少,最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌落 将菌液进行一系列的梯度稀释,然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面,进行培养。在稀释度足够高的菌液里,聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞,从而能在培养皿表面形成单个菌落操作注意事项 第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环,在划线操作结束时,仍然需要灼烧接种环。在灼烧接种环之后,要等其冷却后再进行划线,以免接种环温度太高,杀死菌种 涂布平板的所有操作都应在火焰附近进行。应从操作的各个细节上保证“无菌”。例如,对涂布器等接种器具进行消毒和灭菌、酒精灯与培养皿的距离要合适、吸管头不要接触任何其他物体、吸管要在酒精灯火焰周围等等
1.某工厂为了生产耐高温植酸酶饲料添加剂,开展了产该酶菌株的筛选、酶的固定化及其特性分析研究,其流程如下图所示。
→→→→→
请回答:
(1)土壤悬液首先经80 ℃处理15分钟,其目的是筛选出________。
(2)在无菌条件下,将经过处理的土壤悬液进行________,然后涂布于含有植酸钠的固体培养基上。培养后观察到________,其周围出现透明水解圈,圈的直径大小与________强弱相关。
(3)筛选获得的菌株经鉴定后,将优良菌株进行液体扩大培养。培养时需要振荡,其主要目的是________。液体培养基与固体培养基相比,不含有的成分是________。
【解析】 (1)对土壤悬液进行高温处理,大部分菌种被高温杀死,可筛选出耐高温的菌株。(2)涂布分离法是分离培养细菌的常用方法,需要先将培养的菌液稀释,再涂布到固体培养基平面上,以得到相互分开的单菌落。在含植酸钠的培养基上,目标菌株可分解植酸钠,在其菌落周围形成透明水解圈,植酸酶的活性越强,单位时间内分解的植酸钠越多,形成的透明圈越大。(3)筛选获得的菌株经鉴定后需转至液体培养基中扩大培养,培养时需要振荡,振荡的目的是增加液体培养基中的氧气浓度。制备固体培养基的过程中需要加入溶化的琼脂,琼脂冷却后呈固态。【答案】 (1)耐高温菌株 (2)稀释 单菌落 植酸酶的活性 (3)供氧 琼脂
2.空气中的微生物在重力等作用下,可以一定程度地沉降。某研究小组欲用平板收集教室空气中的微生物,以了解教室内不同高度空气中微生物的分布情况。实验步骤如下:
①配制培养基(成分:牛肉膏、蛋白胨、NaCl、X、H2O);
②制作无菌平板;
③设置空白对照组和若干实验组,进行相关操作;
④将各组平板置于37 ℃恒温箱中培养一段时间,统计各组平板上菌落的平均数。
回答下列问题:
(1)该培养基中微生物所需的氮来源于_______
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