琼脂糖凝胶基片用于蛋白质与抗原分子的固定研究与表征.pdfVIP

生垦塞堕堡堑堂2塑堡垒旦箍!!鲞筮垒塑 _‘-——503。__—— 文章编号：1007—42s7(2007)04—0503—06 琼脂糖凝胶基片用于蛋白质与 抗原分子的固定研究与表征 虞伟1，廖建辉2，葛存旺2，顾宁2，李晓军1，武建国1 (1．南京军区南京总医院解放军临床检验医学研究所中心实验科，江苏南京210002； 2．东南大学分子与生物分子电子学国家重点实验室，江苏南京210096) 摘要：目的探索一种薪型的适用于生物分子偶联的固相载体，并对其用于蛋白质与抗原分子微阵列制作的实 验条件和检测结果进行评价。方法于氨基硅烷化的载玻片表面制作琼脂糖凝胶膜，经Nal04氧化和戊二醛分子偶 联后，得到3种不同的凝胶表面，分别考察其固定生物分子的偶联效率、检测敏感度和稳定性能，并用原子力显微术和 x射线光电子能谱对其表面进行表征和对比研究。结果未经氧化的琼脂糖凝胶基片固定生物分子的能力和检测敏 感度低于经Nal04氧化与后续醛化处理的基片，其中又以后者的应用效果最佳，温度因素(实验温度分别为37℃、25℃ 和4℃)对用此法制作的蛋白质与抗原分子微阵列的使用无显著影响。表征结果提供了琼脂糖凝胶表面固定生物分 子的直接证据和内在机制。结论经修饰处理的琼脂糖凝胶基片可有效固定不同的生物分子，用其作为固相表面制 作的蛋白质与抗原分子微阵列可取得较为理想的实验效果。 关键词：微阵列；琼脂糖；抗原；自身抗体；表征 中图分类号：QS03 文献标识码：A usedfor and ilnmobilizationandcharacterizationYU Curt- hgar噼gd鲺血吲瞳ateproteinanUge Weil，LIAOJian-hui2，GE 耐，eta1．(1．De脚nt Molecularand Biomol∞ular KeyLaboratoryof Electronics，SoutheastUniversity 舭呵唱已聊rⅫ耐210002，‰；2．National 210096，Ch／aa) To is forbiomolecules evaluate anovelsolid suitable cross theex— Abstract：Objectiveinvestigate support，which linking，and as conditionsof and wellas resultswhichdetection．Methods perimental proteinantigenmicrtmrraypreparationassay by Agaro*gd was onthe ofAPTES-modified oxidationwith andCROSS with surface slides，followed Nal04 layerpIqmed by linkingglutaraldehyde wereachieved．F