转基因玉米pUC57-BT11质粒标准分子的构建与适用性研究.pdfVIP

第32卷第6期 计 量 学 报 V01．32，№6 20l l ACTAMETROLOGICAsINICA 1 1年 1月 NoVember，20l do“10．3969／j．issn．1000-11韶．20．∞．19 转基因玉米pUC57一BTll质粒标准分子的 构建与适用性研究 董莲华， 李 亮， 王 晶， 赵正宜， 臧超 (中国计量科学研究院，北京100013) puC57．BTll，经酶切和测序验证后，对其特异性进行检查。采用测序和荧光定量PCR法对该质粒分子进行定值， 结果为1．Ol±O．01(七=2)。通过质粒分子和基因组DNA产生的内源和外源基因比较，发现两者标准曲线斜率无 显著差异，线性相关系数均≥O．99。利用puc57一BTll质粒分子对已知含量的转基因基体标准物质进行转基因含 可作为转基因玉米BTll转化体特异性的定性和定量检测用标准物质。 关键词：计量学；转基因玉米；Brrll；质粒标准分子；标准物质 中图分类号：’rB99 文献标识码：A 文章编号：1000-1158(2011)06JD570旬5 PIasmid 1COnstructiOnand of pUC57-BTl AppIicatiOn GeneticModifiedMaizeLineBTl1 DONG U WANG ZHAO ZANGCh∞ U锄-hua，UaIlg， Jing， Zheng·yi， I璐tituteof (Nati叩al MenoLo舒，BeijiIIg100013，Chim) c哪咖cta mnt AbnnIct：To ph8midpUc57-BTllincluding 0fnle i8detected．11le eIlzy眦digestion舭d8eqIle眦吨，‰8peci矗cphslnidpUc57·BTll product．A舶r瑚triction value standardcurve i81．Ol±0．01(后=2)deterIIlinedby鲁eqIle眦吨锄d瑚lti妣PcI乙Byc锄p耐∞n pm呻ty ofPBTll witll cllⅣeisfoundAu generatedbyphsInidge肿InicDNA，∞8i印ific蚰td蕊尬眦e‰∞n岫sl叩∞0f岫standard c仇Tehtedcoe伍ciem萨锄≥O．99．Ceni6ed PCRwhen CM毗tri】【materialB龇detec涮byqIl_蚰ti枷ve pBTllph8rnid r嘲u1协det锄i舱d PCR耐tlI a聆identical DNAi8used聃qIl粕tmcati∞st粕dards．711lebyqIl卸tit“ve pBTll witI